鳗弧菌和杀鲑气单胞菌是水产养殖中两种常见的病原菌,导致世界各地的水产养殖业蒙受巨大损失。疫苗接种是预防各类养殖病害最为有效的措施之一。考虑到安全性、功效和成本等因素,鱼用疫苗目前仍以灭活疫苗为主。然而,灭活疫苗免疫保护效果常不尽人意,需通过添加佐剂来增强疫苗效果。尽管常规商业化鱼用佐剂仍以油佐剂为主,但油佐剂会引起内脏黏连、佐剂残留和生长抑制等副作用。因此,对于鱼用疫苗的研制,开发副作用更为温和的非油佐剂是十分必要的。本论文首先基于三种CpG ODNs构建了 pCpG佐剂,以大菱鲆为实验动物,考察了该pCpG佐剂配合鳗弧菌灭活疫苗的免疫保护效果。结果表明,pCpG佐剂可提高鳗弧菌灭活疫苗免疫保护效果,且佐剂剂量与疫苗免疫效应非正相关。同时,pCpG佐剂可有效降低鳗弧菌灭活疫苗抗原含量,在低剂量抗原免疫下为大菱鲆提供了高达84%的RPS,较无佐剂疫苗组增加43%。对体内免疫应答的检测结果表明pCpG佐剂可以有效提高大菱鲆体内抗体水平并激活固有免疫和适应性免疫应答。由此可见,pCpG佐剂可作为后续鱼用疫苗开发的候选佐剂种类。另外,本论文还基于铝佐剂制备了杀鲑气单胞菌灭活疫苗,并以大菱鲆为实验动物考察了疫苗免疫保护效果。结果表明,铝佐剂疫苗副作用较油佐剂疫苗显著降低,并可激发大菱鲆血清特异性抗体产生。综上所述,本课题探索了两种安全性能较油佐剂更佳的佐剂种类在鱼用疫苗开发中的应用潜力,为筛选安全有效的鱼用疫苗佐剂提供参考。