针灸对CTX小鼠血清中Rac1及Tie2表达含量影响的研究

来源 :河南中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:wangmeiqing
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目的通过与空白组、模型组的对比,观察在针刺和艾灸的干预下,以环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)化疗后小鼠模型血清中小G蛋白Rac1和酪氨酸激酶受体Tie2含量的变化,为针灸改善化疗后骨髓抑制,升高白细胞提供实验室依据。方法挑选7周龄,体重在22±2g范围的SPF级KM种雄性小鼠80只,按照所需治疗天数的不同,随机分组,其中3天组40只,5天组40只,再把两组小鼠随机分为空白组(A3组、A5组)、造模组(B3组、B5组)、针疗组(C3组、C5组)、灸疗组(D3组、D5组),共8个亚组,每亚组各10只小鼠。各组小鼠按体重在无菌操作台造模注射,空白组小鼠以0.02ml/g规格腹腔注射0.9%NaCl溶液,接连注射3天。其余6组小鼠注射方法与空白相同,仅选取注射液不同,每天以5mg/ml的CTX溶液即100mg/kg,进行腹腔注射,连续注射3天,停药后4小时即造成骨髓抑制造模。针疗组和灸疗组小鼠均选取“大椎”、“膈俞”、“肾俞”、“足三里”治疗,针疗组以1.9×10mm规格的毫针对上述穴位进行直刺,留针6分钟,每天1次,分别治疗3天和5天。灸疗组以0.4×12cm规格的特制艾条,于小鼠穴位上2cm处施灸3分钟,每天1次,分别治疗3天和5天。空白组和造模组小鼠只做抓取陪同固定。实验期间每天早晨不变时段取小鼠尾静脉血,专人实施外周血白细胞镜检并计数。各组小鼠分别在治疗3天和5天后的次日,取小鼠眼球血,静置30min后离心,取其血清,然后放置到-80℃冰箱中保存以便备检。采取ELISA法检测小鼠血清中的Rac1和Tie2的含量。运用SPSS20.0 for Windows软件进行数据统计分析。结果1造模后,与空白组比,其他3组小鼠外周血白细胞均降低(P<0.05);治疗3天后,模型组、针疗组、灸疗组均低于空白组(P<0.05);与模型组比,针疗组和灸疗组均有升高(P>0.05);治疗5天后,空白组白细胞数多于模型组(P<0.05);针疗组、灸疗组白细胞数高于空白组和模型组(P<0.05);针疗组与灸疗组比,无明显差异(P>0.05)。2治疗3天后,针疗组、灸疗组Rac1含量均高于造模组(P<0.05);灸疗组含量低于针疗组(P<0.05)。治疗5天后,针疗组、灸疗组Rac1含量低于模型组(P<0.05);灸疗组小鼠Rac1的含量高于空白组(P>0.05);针疗组高于灸疗组(P<0.05)。3治疗3天后,与模型组比,针疗组、灸疗组Tie2含量均低于后者(P<0.05);针疗组Tie2较灸疗组低(P<0.05)。治疗5天后,针疗组、灸疗组与模型组比,Tie2的含量均低于后者(P<0.05);灸疗组多于空白组(P>0.05);与灸疗组比,针疗组高于灸疗组(P<0.05)。结论1化疗所致小鼠骨髓抑制,可以在针刺和艾灸的干预作用下得以改善,从而升高因造血干细胞分化减少的外周血白细胞。在针刺和艾灸的作用下,白细胞较模型组提前回升,且治疗5天后白细胞计数超过正常水平且偏高,与导师组前期相关研究结果一致。2化疗对骨髓造血系统造成损伤,Rac1在外周血的表达与骨髓抑制成负相关,当Rac1在血清中高表达时,表明骨髓造血的损伤程度越高,通过针灸治疗后,外周血中Rac1含量的变化,反映了骨髓造血系统的修复,进而验证了针灸拮抗骨髓抑制的作用。3化疗后小鼠血清中Tie2的含量升高,经过针刺和艾灸的干预后,血清中的Tie2含量降低,表明针灸可以减轻化疗对造血环境的损伤,加快HSC的增殖分化,恢复造血功能的重建。
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