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第一部分表阿霉素对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制目的寻找表阿霉素引起HepG2细胞早期应激即引起细胞的自身修复时所需的孵育时间和药物浓度。方法噻唑蓝(MTT)实验检测不同浓度的表阿霉素在不同的孵育时间段里对HepG2细胞的增殖活性的抑制和IC50(IC50)。结果表阿霉素对HepG2细胞的增殖抑制是药物浓度和孵育时间依赖性的,细胞的IC50为78.14±3.27μg/ml。结论在应激早期即表阿霉素孵育较短时间(12小时),或较小应激即较低浓度的表阿霉素(<40μg/ml)作用时,相关的自噬可能上调,这种孵育时间和药物浓度可以作为最佳的实验条件,进行下一步的实验。第二部分Bcl-2信号通路阻断对肝癌HepG2细胞化疗敏感性的影响目的比较单独ABT737、单独表阿霉素或联合应用对HepG2细胞凋亡和自噬的影响,并探讨分子机制。方法采用MTT法测定对HepG2细胞增殖的抑制作用;应用流式细胞技术检测对于HepG2线粒体膜电位和凋亡的影响,应用MDC荧光染色观察给药后自噬和凋亡的发生以及采用western blot测定p62、p53、beclin1、LC-3I、LC3Ⅱ的蛋白表达水平。结果ABT737(1μmol/L)可随时间延长而抑制肝癌细胞增殖、凋亡率明显增加以及线粒体膜电位明显下降,自噬囊泡增多,给药12小时后明显增加了p62、p53、beclin1、LC3Ⅱ的蛋白表达水平,明显降低了LC-3I的蛋白表达水平。当与表阿霉素(20μg/mL)联合应用时,明显比单独应用表阿霉素时增加凋亡率、降低了膜电位,并明显增加了p53、Beclin1的表达,明显增加了LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比率。结论阻断Bcl-2通路可诱导HepG2细胞凋亡和自噬,而联合表阿霉素使用时能够使凋亡和自噬水平增加,提高HepG2细胞的化疗敏感性。第三部分mTOR信号通路阻断对肝癌HepG2细胞化疗敏感性的影响目的比较单独雷帕霉素、单独表阿霉素或联合应用对HepG2细胞凋亡和自噬的影响,并探讨分子机制。方法采用MTT法测定对HepG2细胞增殖的抑制作用;应用流式细胞技术检测对于HepG2线粒体膜电位和凋亡的影响,应用MDC荧光染色观察给药后自噬和凋亡的发生以及采用western blot测定p62、p53、beclin1、LC-3I、LC3Ⅱ的蛋白表达水平。结果雷帕霉素(50nmol/L)可随时间延长而抑制肝癌细胞增殖、凋亡率明显增加以及线粒体膜电位明显下降,自噬囊泡增多,给药12小时后明显增加了p62、p53、beclin1、LC3Ⅱ的蛋白表达水平,明显降低了LC-3I的蛋白表达水平。当与表阿霉素(20μg/mL)联合应用时,明显比单独应用表阿霉素时增加凋亡率、降低了膜电位,并明显增加了LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比率以及p62表达。结论阻断mTOR通路可诱导HepG2细胞凋亡和自噬,而联合表阿霉素使用时能够使凋亡和自噬水平增加,提高HepG2细胞的化疗敏感性。