【摘 要】
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本文建立了四种用于检测伏马毒素B1(FB1)和T-2毒素(T-2)的可视化荧光免疫层析试纸条方法,四种方法均可用于玉米、大米、小米和大麦四种谷物样品中FB1和T-2的快速检测。FB1量子点标记免疫层析试纸条(FB1-QDICA)研制过程中,采用活化酯法制备了量子点-抗体(QDs-Ab)偶联物,并确定了试纸条最佳工作条件:量子点、抗体、活化剂的最佳偶联摩尔比为1:2:1500;试纸条最适上样缓冲液为
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本文建立了四种用于检测伏马毒素B1(FB1)和T-2毒素(T-2)的可视化荧光免疫层析试纸条方法,四种方法均可用于玉米、大米、小米和大麦四种谷物样品中FB1和T-2的快速检测。FB1量子点标记免疫层析试纸条(FB1-QDICA)研制过程中,采用活化酯法制备了量子点-抗体(QDs-Ab)偶联物,并确定了试纸条最佳工作条件:量子点、抗体、活化剂的最佳偶联摩尔比为1:2:1500;试纸条最适上样缓冲液为pH 7.4 PB;羊抗鼠IgG和包被原(FB1-OVA)稀释倍数分别为400倍和40倍;QDs-Ab和工作液最佳添加量分别为0.3 μL和5 μL;FB1-QDICA的可视化检测限为2 μg/L,在样品中检测限为 20 μg/kg。FB1量子点荧光猝灭免疫层析试纸条(FB1-FQICA)的研制过程中,制备了量子点标记鸡卵白蛋白(QDs-OVA)偶联物和胶体金标记抗体(AuNPs-Ab)复合物,并确定了试纸条最佳工作条件:制备AuNPs-Ab时K2C03和抗体最佳添加量分别为20 μL和25 μL;试纸条缓冲液为pH 7.4 PBS;FB1-OVA和QDs-OVA偶联物的稀释倍数分别为1:10稀释和20倍;AuNPs-Ab最佳添加量为3 μL;FB1-FQICA的可视化检测限为1 μg/L,样品中检测限为10 μg/kg。T-2量子点荧光猝灭免疫层析试纸条(T-2-FQICA)的最佳工作条件为:K2CO3和抗体最佳添加量分别为10 μL和50 μL;试纸条缓冲液为pH 7.4 PBS;包被原(T-2-OVA)和QDs-OVA偶联物的稀释倍数分别为1:12稀释和20倍;AuNPs-Ab最佳添加量为3 μL;T-2-FQICA的可视化检测限为2μg/L,样品中检测限为20 μg/kg。FB1和T-2多残留荧光猝灭免疫层析试纸条方法的可视化检测限分别为1μg/L和2μg/L;样品中检测限分别为10μg/kg和20 μg/kg,检测时间15 min。通过交叉反应测得四种试纸条检测方法特异性良好,实际样品分析结果显示方法与商业化ELISA试剂盒测定结果一致。
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