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目的自身免疫性肝炎(Autoimmune Hepatitis,AIH)是一种免疫过度活跃介导的以肝脏为靶器官的获得性自身免疫性疾病。传统观念中B细胞主要通过产生特异性抗体及提呈抗原正向调节免疫反应参与自身免疫疾病的发病[1,2]。随着研究的深入,一类被命名为调节性B细胞(Regulatory B cells,Bregs)的具有负向免疫调节功能的B细胞亚群进入人们的视野,其主要通过产生IL-10等免疫抑制性细胞因子发挥作用[3]。研究发现,多种自身免疫性疾病的发生均和异常的B细胞数目及功能相关。目前B细胞亚群参与AIH发病的机制尚不明确,因此本研究通过对AIH患者及健康对照者外周血经典B细胞亚群、Bregs细胞的变化及相关抑制性细胞因子IL-10的表达进行检测,初步探讨其在AIH发病机制中的意义。方法选取2016年10月至2017年12月于天津医科大学总医院消化科就诊的AIH患者30名,患者均尚未接受免疫治疗,并排除其他免疫疾病或恶性肿瘤病史。阴性对照组为30名从天津医科大学总医院查体中心随机抽取的与AIH组信息(性别、年龄等)相匹配,且既往无肝功能损害、自身免疫性疾病或恶性肿瘤病史的体检者。收集受试者空腹外周静脉血,提取单个核细胞,在LPS+淋巴细胞刺激液(BD公司)刺激下培养5小时。第一部分AIH患者外周血B细胞及经典B细胞亚群数量分析流式细胞术检测并比较AIH组及阴性对照组外周血B细胞占淋巴细胞比例,及四种经典B细胞亚群(CD19+CD27-CD38++未成熟B细胞、CD19+CD27-CD38-/+幼稚B细胞、CD19+CD27+CD38-/+记忆B细胞、CD19+CD27+CD38++浆细胞)的比例差异。第二部分AIH患者外周血IL-10表达水平采用酶联免疫吸附试验(ELSIA)法,检测AIH组及阴性对照组外周血清中的IL-10水平。第三部分AIH患者外周血调节性B细胞表型鉴定及亚群分析流式细胞术检测并比较AIH组及阴性对照组外周血CD19+IL-10+调节性B细胞比例,确定AIH患者外周血调节性细胞亚群表型,检测并比较AIH组和阴性对照组外周血调节性B细胞亚群比例的差异。结果(1)AIH患者外周血CD19+B细胞占淋巴细胞的比例为(7.29%±2.59%),与阴性对照组(8.28%±2.13%,P=0.11)比较无统计学差异。AIH患者外周血CD19+CD27-CD38++未成熟B细胞占CD19+B细胞的比例为(6.78%±1.78%),与阴性对照组(7.28%±1.25%,P=0.215)比较无统计学差异;CD19+CD27+CD38++浆细胞占CD19+B细胞的比例为(4.43%±1.11%),显著高于阴性对照组(1.75%±0.64%,P<0.001);CD19+CD27+CD38-/+记忆B细胞占CD19+B细胞的比例为(31.63%±6.76%),显著高于阴性对照组(21.29%±5.19%,P<0.001);CD19+CD27-CD38-/+幼稚B细胞占CD19+B细胞的比例为(57.16%±7.87%),显著低于阴性对照组(69.18%±5.19%,P<0.001)。(2)AIH患者外周静脉血清中IL-10水平为[(45.31±8.06)pg/ml],低于阴性对照组[(52.85±7.52)pg/ml,P=0.044]。(3)AIH患者外周血CD19+B细胞中CD19+IL-10+细胞的比例为(0.84%±0.28%),显著低于阴性对照组(2.34%±0.62%,P<0.001)。AIH患者外周血CD19+B细胞中CD19+CD24hiCD38hi(调节性B细胞)的比例为(3.17%±0.92%),显著低于阴性对照组(5.93%±1.12%,P<0.001);CD19+CD24hiCD27+(前调节性B细胞+调节性B细胞)的比例为(6.05%±1.21%),显著低于阴性对照组(10.37%±1.25%,P<0.001)。结论AIH患者相较于阴性对照组,外周血B细胞比例无明显差别,但其亚群的构成比存在差异。其中记忆B细胞、浆细胞比例显著增高,幼稚B细胞比例显著降低。AIH患者体内抑制性细胞因子IL-10水平降低,Bregs细胞数量及功能降低,导致其不能有效的抑制炎症反应,提示B细胞亚群数量和功能的失衡可能参与了AIH的发病。