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背景和目的：脑血管疾病目前已成为我国致死率、致残率较高的疾病之一,而缺血性疾病占脑血管疾病中的70-80%,因此积极有效的进行临床干预治疗具有重大的社会意义。rhG-CSF(重组人粒细胞集落刺激因子)是一种造血生长因子,具有促进中性粒细胞系造血祖细胞增殖分化的能力。近来国外有越来越多的实验研究证据显示,其在神经组织的修复和功能恢复中发挥着重要作用,如促神经细胞再生、抗神经细胞凋亡、促血管再生、抗炎及免疫调节等。然而rhG-CSF对脑缺血后神经细胞保护的具体机制却尚未清楚,其对巨自噬的影响也鲜见报道。本研究观察了脑缺血后体内及体外神经元LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值的变化,探讨了r hG-CSF对巨自噬的调控及其可能的神经保护机制,为临床应用提供理论依据。方法：采取氧糖剥夺(OGD)法制作细胞缺氧模型；Western blot法检测不同浓度rhG-CSF干预下细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值变化,单丹磺酰戊二胺(MDC)法荧光分析巨自噬空泡变化,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性；应用改良线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型,rhG-CSF干预前后进行改良的神经功能缺损评分(mNSS)评定,Western blot法检测大鼠皮层神经元LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值变化,免疫组化法检测LC3蛋白表达变化。结果：rhG-CSF处理后的细胞缺氧模型,低、高剂量组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值较未加药组上调,高剂量组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值较低剂量组上调,显示了随rhG-CSF给药剂量浓度的增加,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值也逐渐增加,差异均具有统计学意义(p<0.05)；MDC染色显示随rhG-CSF给药浓度增加,巨自噬空泡数量逐渐上调,呈剂量依赖性,显示随给药浓度增加,自噬活性也相应增强,差异具有统计学意义(p<0.05)；rhG-CSF组大鼠神经功能学评分较模型组有降低,差异有统计学意义(p<0.05)；治疗后较治疗前比较,大鼠的神经功能学评分有降低,差异有统计学意义(p<0.05),显示rhG-CSF治疗下有修复神经系统的作用；大鼠模型组的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值较假手术组上调,差异有统计学意义(p<0.05),显示局灶性脑缺血后巨自噬水平升高；大鼠rhG-CSF组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值较假手术组及模型组上调,差异有统计学意义(p<0.05),表明rhG-CSF干预下可上调大鼠局灶脑缺血后巨自噬活性。结论：rhG-CSF可能具有增强局灶缺血神经细胞巨自噬的作用,且具有促进神经元细胞增殖活力的作用,且有随剂量浓度增加作用增强的趋势。局灶性脑缺血后rhG-CSF干预可能通过上调巨自噬水平参与神经元的保护。