基因组不稳定是肺癌发生发展过程中的早期事件，因此而引起的基因拷贝数的扩增和丢失常常可能成为细胞恶性转化的重要分子机理。本研究旨在筛选支气管上皮细胞恶性转化过程中拷贝数扩增的基因，验证并分析基因的高拷贝对其RNA及蛋白质表达的影响。本实验利用业已建立的支气管上皮细胞体外恶性转化模型，通过cDNA microarray-CGH技术对支气管上皮来源的永生化细胞和癌变细胞的基因拷贝数进行了检测；采用real-time PCR及免疫组化技术验证和分析了DNA拷贝数，RNA及蛋白质表达水平的变化情况。结果发现，在永生化BEP2D细胞中染色体扩增区域分布在5q31.3，9q32～33.1，14q22.2～23.1，19p13.12～13.13，20q13.12～13.31；；恶性转化BERP35T2细胞中的扩增区域集中在1p12～13.1，5q33.1，5q31.3，9q32，19p13.12～13.13。其中5q31.3，9q32，19p13.12～13.13是两种细胞系中的共同扩增区域。在永生化BEP2D细胞和恶性转化BERP35T2细胞中筛选到的646个异常拷贝数的基因中，有496个基因发生了扩增。对PCNA、p53以及GADD45A的real-time PCR的验证结果显示，这些基因在永生化和恶性转化细胞中的拷贝数均明显高于正常胎盘DNA，与芯片结果一致。在RNA水平上，PCNA、p53以及GADD45A表达丰度高于正常肺组织；在蛋白质水平上的观测结果也显示，PCNA和P53呈现强阳性表达。此外，基因序列分析发现，p53第八外显子位于13811bp处的碱基发生点突变。以上结果表明，在支气管上皮细胞恶性转化过程中，基因拷贝数扩增可能是影响某些重要基因表达水平和生物学功能异常的重要因素之一。