药物筛选模型是寻找和发现新药的重要方法之一。近年来,随着分子生物学、药学及现代色谱技术等学科的迅猛发展,涌现出大量新型的药物筛选模型。这些新型药物筛选模型具有筛选方法简便、筛选过程迅速,并且可以实现高通量筛选等特点。近几年,DNA折纸技术的发展及应用越来越成熟,DNA折纸主要的优点包括具有空间可寻址、生物相容性好、制备过程简单及表面易于修饰等。本文拟利用DNA折纸以上的特点,将其作为生物载体把核受体PPARγ负载在其表面,然后采用化学键合的方法将二者的缀合物共价键合在无机材料硅胶表面,最后将硅胶填充于不锈钢色谱柱中,从而构建一种新型基于DNA折纸色谱的药物筛选模型。首先,以Ecoil. JM109为噬菌体M13 mp18的宿主,通过聚乙二醇沉淀纯化,采用酚抽提得到M13 mp18 ssDNA,采用琼脂糖凝胶对其进行表征；以BL21 (DE3)菌为PPARγ-LBD蛋白的表达菌株,进行诱导表达、提取、及纯化得到PPARγ-LBD蛋白,采用SDS-PAGE电泳对其进行表征；在PCR仪中采用特定的程序,以M13mp18 ssDNA为脚手架链,在订书钉链的辅助下,组装得到DNA折纸结构；DNA折纸结构表面的“捕获链”与PPARγ蛋白表面修饰的DNA链通过碱基互补配对将PPARγ组装到DNA折纸表面,采用琼脂糖凝胶电泳和AFM对其进行表征;以SMCC为交联剂,将PPARγ-DNA折纸缀合物键合到巯丙基硅胶表面,得到核受体PPARγ组装DNA折纸色谱固定相；将此固定相装填于不锈钢色谱柱中,完成核受体PPARγ组装DNA折纸色谱药物筛选模型的构建。其次,本文对核受体PPARγ组装DNA折纸色谱药物筛选模型的亲和性和特异性进行了评价。以未组装核受体PPARγ的色谱柱为阴性对照柱,观察阳性药物罗格列酮在阴性对照柱和核受体PPARγ组装DNA折纸色谱柱上的保留行为,对本研究构建的药物筛选模型的亲和性进行评价；以扑热息痛为阴性药物,罗格列酮为阳性药物,观察二者在核受体PPARγ组装DNA折纸色谱柱上的保留行为,对本研究构建的药物筛选模型的特异性进行评价。结果表明,核受体PPARγ组装DNA折纸药物筛选模型能够专属性地识别罗格列酮。再次,研究核受体PPARγ组装DNA折纸色谱药物筛选模型在中药人参活性成分筛选中的应用。采用PPARγ组装DNA折纸色谱柱分析人参总皂苷,分别收集有保留的组分和未保留的组分。利用反相色谱分别对人参总皂苷、人参皂苷与PPARγ相互作用并且作用能力较强的组分主要是人参皂苷Re。最后,本文对核受体PPARγ组装DNA折纸色谱药物筛选模型的重复性和稳定性进行了考察。随机选择三批核受体PPARγ组装DNA折纸色谱固定相并装填成色谱柱,观察人参皂苷在三批色谱柱上的保留行为,以此来评价核受体PPARγ组装DNA折纸色谱药物筛选模型的重复性,人参皂苷的分析色谱图基本一致,说明本研究构建的药物筛选模型重复性良好：通过观察人参皂苷在同一色谱柱上的保留行为,来考察核受体PPARγ组装DNA折纸色谱药物筛选模型的稳定性,随着分析时间的延长,人参皂苷的保留时间减短且峰形变窄,说明本研究构建的药物筛选模型的稳定性有待进一步优化。