【摘 要】
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目的: 探讨HCV 基因亚型、机体免疫功能对慢性丙型肝炎患者抗病毒疗效的影响,以及HCV 基因型与机体免疫功能的关系。方法: 治疗前,检测所有入选慢性丙型肝炎病例的血清HCV RN
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目的: 探讨HCV 基因亚型、机体免疫功能对慢性丙型肝炎患者抗病毒疗效的影响,以及HCV 基因型与机体免疫功能的关系。方法: 治疗前,检测所有入选慢性丙型肝炎病例的血清HCV RNA 含量、血清ALT 水平。采用Simmonds 基因分型法于治疗前检测病例组的HCV RNA 基因亚型。将丙型肝炎病毒基因组特异片段固定在尼龙膜每个预定的区域内制成芯片。从待检的血清中分离出HCV RNA,经PCR 扩增和DIG-11-dUTP 标记后,通过碱基互补配对的原理与芯片进行杂交,显色后通过计算机判读杂交信号或与模式图比较判定结果,进而对丙型肝炎患者进行基因型检测。同时于治疗前检测所有入选病例血清IL-4和IFN-γ水平,以及检测健康对照组血清IL-4和IFN-γ。取空腹静脉血2ml,室温静置6小时后离心,取血清-20℃储存,采用双抗体夹心酶联分析法同批测定全部血清标本。IFN-检测方法:从已平衡至室温的密封袋中取出所需反应板,分别将标本及不同浓度标准品(100μL/孔)加入相应反应板孔中, 轻轻混匀30秒后封住板孔,37℃20分钟之后洗板5次,每孔加入5ulAnti IFN-rBiotin 和50ul IFN-r HRP,轻轻混匀30秒,封住板孔,37℃15分钟后再洗板5次。每孔加入50ul底物A和50ul底物B,轻轻混匀10秒,室温避光温育3±2分钟,每孔加入100ul终止液,
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