树莓中花色苷的提取、分离、纯化及抗氧化活性研究

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本课题对树莓花色苷的制取工艺进行了研究,通过比较不同提取方案的效果,对花色苷的提取工艺进行了简单优化,并通过柱层析的方法对粗提物中的花色苷进行了分离和纯化,并通过体外抗氧化实验分析其抗氧化活性。本课题通过研究得出的实验结论如下:1、先对树莓花色苷提取工艺参数进行优化研究,分别获得各因素的最佳参数:乙醇浓度70%、料液比1:8 g/mL、提取时间90 min、提取温度70℃。响应面法优化得最佳提取条件,分别为乙醇浓度为66%、料液比1:8.2 g/mL、提取时间85 min、提取温度为71℃,花色苷得率为1.5%,纯度为12.31%。2、从8种大孔吸附树脂中筛选出的AB-8树脂作为填料,经过静态吸附实验和动态吸附实验,上样浓度为0.94 g/L,上样速度为500 m L/h,溶液pH值为3.0,上样量为8000 mL。经过解吸试验可知,洗脱液选择80%乙醇溶液,洗脱速度为750 mL/h,溶液pH值为3.0,洗脱剂用量为1000 m L,解吸率可达到93.12%。花色苷的纯度从12.31%提高到63.77%,回收率为88.82%。3、利用硅胶柱层析技术分离纯化树莓花色苷,优化获得最佳参数如下:洗脱液,8:2:1(正丁醇-乙酸-水);径高比,1:14;树莓粗品:硅胶,1:200;流速,2 mL/min。经过分离后得到两个花色苷组分RA1和RA2,RA1和RA2得率分别为0.51%和0.62%,纯度分别为84.1%和82.8%。4、经过DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、总还原能力的测定三种方法评价分离纯化得到的树莓花色苷的体外抗氧化活性。两个树莓花色苷样品的抗氧化能力都优于抗坏血酸,而树莓花色苷RA1组分的抗氧化活性在三个评价实验中都优于RA2组分,表现出了更好的抗氧化活性。
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