目的：1、探讨人脑胶质瘤肿瘤干细胞和肿瘤细胞分离、培养与鉴定的方法。2、分析脑胶质瘤肿瘤干细胞和肿瘤细胞间SHH、EGFR、BCL2L12、MMP9、MMP2基因表达。方法：1、采用直接培养法分离培养人脑胶质瘤肿瘤干细胞和肿瘤细胞。参照神经干细胞培养条件,对肿瘤干细胞进行体外培养,观察其增殖、分化情况,并进行CD133、nestin免疫细胞化学鉴定。2、采用Trizol法分别提取脑胶质瘤肿瘤干细胞和肿瘤细胞RNA。3、采用实时荧光定量PCR检测肿瘤干细胞和肿瘤细胞中ABCG2、SHH、EGFR、BCL2L12、MMP9、MMP2基因表达情况,然后分析他们在两种细胞中表达是否有差异。结果：1、肿瘤干细胞直接培养7d后,可形成大量悬浮生长的神经球,nestin及CD133免疫反应均成阳性反应。2、采集各基因的CT值进行转换后进行统计分析,ABCG2、SHH、EGFR、BCL2L12、MMP9、MMP2在肿瘤干细胞中的表达均高于肿瘤细胞中的表达,分别为ABCG2(t=4.87; P<0.001)、SHH(t=7.68; P<0.001)、EGFR(t=20.39; P<0.001)、BCL2L12(t=5.79; P<0.001)、MMP9(t=7.86; P<0.001)、MMP2(t=7.31; P<0.001)。ABCG2、SHH、EGFR、BCL2L12、MMP9、MMP2在肿瘤干细胞间的表达并不一致(F=4.18,F0.05.5.60,=2.37<4.18,P<0.05)。结论：1、人脑胶质瘤中存在具有神经干细胞特性的肿瘤干细胞,CD133和nestin是脑肿瘤干细胞重要的表面标记,可以用于脑肿瘤干细胞的鉴定。2、ABCG2、SHH、EGFR、BCL2L12、MMP9、MMP2在肿瘤干细胞中的高表达为针对肿瘤干细胞从根本上治疗脑胶质瘤提供了理论依据。