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新城疫(Newcastle disease,ND)是威胁养禽业的一种重要传染病,给养禽业造成巨大的损失,国际兽医局将其与高致病性禽流感一起列为危害养禽业的必须报告的疾病。自1997年以来,华南和华东地区部分省市发生了新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染鹅的病例,虽然各地采取了积极的防治措施,但该病仍然蔓延、流行。本研究对获得的抗NDV F蛋白单克隆抗体是否能够对不同来源的新城疫病毒进行了分析,并初步建立了快速检测鹅源新城疫病毒的方法,为更好地诊断、防控新城疫打下基础。采用感染NDV F48E8的鸡胚成纤维细胞建立了间接免疫荧光试验,对本室保存的抗NDV F蛋白的原始杂交瘤细胞进行培养、亚克隆,筛选出12株能稳定分泌抗NDV F蛋白的阳性杂交瘤细胞株,分别命名为NDV-F 1B4、NDV-F 4B11、NDV-F5F3、NDV-F 4C1、NDV-F 2H10、NDV-F 6F8、NDV-F 4H10、NDV-F 1D10、NDV-F2F12、NDV-F4D9、NDV-F5C6、NDV-F6C4,并通过间接免疫荧光试验测定了所获得的12株抗NDV F蛋白单抗腹水的效价, IFA效价在1:1600到1:12800;8株单抗属于IgG2a,2株单抗属于IgG2b;IgM和IgG1各1株;中和试验证明,12株抗NDV F单克隆抗体中,3株单抗有一定程度的中和价,其中单抗NDV-F 4D9的中和能力最强;所有单抗在Western blot试验中均能识别不同来源NDV的F蛋白。用不同试验对本实验室分离保存的鹅源、鸽源及鸡源新城疫病毒进行了单抗反应性分析。结果表明,12株单抗对不同源性的NDV F蛋白均有不同程度的IFA、Western-blot、ELISA反应性。通过间接免疫荧光技术建立了快速检测鹅源新城疫的方法。该方法特异性强,并且用100TCID50 GNDV感染鸡胚成纤维细胞,在感染后18h就可以检测到GNDV,比一般的鸡胚接种方法和RT-PCR方法方便,快捷,准确性高。