罗格列酮联合顺铂对A549细胞裸鼠移植瘤抑制作用的实验研究

来源 :南华大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:guoyinglonggyl
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目的观察过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gammar PPARγ)激动剂罗格列酮(rosiglitazone ROZ)与顺铂(cisplatin DDP)合用对人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法建立人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,将28只成瘤裸鼠随机分成7组:①对照组(生理盐水0.2ml),②DDP 1mg/kg组,③DDP 4mg/kg组,④ROZ 10mg/kg组,⑤ROZ 30mg/kg组,⑥ROZ 10mg/kg+DDP 1mg/kg组,⑦ROZ 30mg/kg+DDP 1mg/kg组,接种10天后开始给药,以上组别均采用隔天腹腔注射给药,共8次。用药期间,每4天用游标卡尺测量皮下移植瘤的长短径,按通用标准公式计算皮下移植瘤体积,绘制皮下移植瘤生长曲线;于最后一次给药后48h脱颈臼处死各组裸鼠,剥离皮下移植瘤并称重,计算皮下移植瘤瘤重抑制率,金氏公式计算q值,评价联合用药效应;HE染色,镜下观察移植瘤的组织形态变化;免疫组织化学法检测各组移植瘤中PPARγ、第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten PTEN)、磷酸化丝苏氨酸激(Phosphorylation Serine-threonine kinase pAkt)和半胱天冬酶3(cysteinyl aspartate-specific protease 3 caspase-3)蛋白表达。结果(1)罗格列酮和顺铂均使移植瘤体积增长受到抑制,30mg/kg罗格列酮与1mg/kg顺铂联合组抑制作用明显增强。(2)罗格列酮和顺铂均能抑制移植瘤瘤重的增加,各组瘤重分别为283.98±35.37mg , 197.70±88.69mg ,96.50±19.76mg , 175.02±5.37mg , 142.83±44.54mg , 135.70±25.27mg ,45.70±9.65mg,用药组瘤重明显低于对照组(283.98±35.37mg)(p<0.01);其移植瘤的瘤重抑制率分别为30.28%,65.85%,38.38%,49.65%,52.11%和83.80%。(3)10mg/kg、30mg/kg罗格列酮与1mg/kg顺铂联合组较1mg/kg顺铂组抑瘤作用明显增强(p<0.05),两组q值分别为0.91,1.29。(4)免疫组化结果显示:10mg/kg、30mg/kg罗格列酮组与对照组比较,移植瘤内PPARγ、PTEN、caspase-3蛋白的表达增高,而pAkt的表达下降,联合用药组该调节作用进一步增强。(5)不良反应:4mg/kgDDP组给药后体重低于给药前体重(p<0.01),其余各组无明显不良反应。结论1罗格列酮具有抑制人肺癌A549裸鼠移植瘤的生长作用。2罗格列酮能增强顺铂对人肺癌A549裸鼠移植瘤生长的抑制作用,两者合用具有协同作用。3罗格列酮对人肺癌A549裸鼠移植瘤生长抑制和化疗增敏作用机制可能与罗格列酮激活PPARγ,上调PTEN的表达、抑制pAkt的表达和激活caspase-3有关。
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