人工感染新城疫病毒鸡的肾脏组织蛋白质组学分析

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新城疫病毒(NDV)是一种能够引起鸡和多种禽类的急性高度接触性传染病的病毒,近年来新城疫的流行日益复杂,免疫失败屡屡发生,新城疫依旧是危害养禽业的重要传染病。在临床研究中新城疫病毒被认为具有很好的选择性抗肿瘤的特性,因此现代医学研究也给予了越来越多的重视,本研究利用蛋白质组学以及相关的分子生物学技术对新城疫病毒感染鸡肾脏组织的部分差异表达蛋白进行鉴定,并且按照差异蛋白的功能和亚细胞定位进行归类,旨在蛋白水平揭示NDV与宿主组织细胞之间的相互作用关系,并且揭示NDV相关的致病机制。本研究利用双向电泳技术(2-DE)对NDV感染肾脏组织后四个时间点差异表达蛋白进行筛选,鉴定出一系列具有明显差异的蛋白,通过对各种数据库和文献的参考发现这些差异蛋白主要与细胞骨架,应激反应,糖代谢,能量代谢,细胞凋亡有关系,为进一步验证差异表达的蛋白,本研究采用荧光定量技术对部分差异表达的蛋白(膜偶联蛋白A5,葡萄糖调节蛋白78,载脂蛋白A1,28kda-维生素依赖的钙离子结合蛋白,卵转铁蛋白,β微管素等)在mRNA水平进行验证,结果与2-DE结果保持一定的一致性,并且利用western blot技术对78kda葡萄糖调节蛋白,膜偶联蛋白A5,28kda维生素依赖的钙离子结合蛋白进行验证,结果与双向结果完全一致。本研究获得了比较全面,准确的NDV人工感染鸡肾脏的差异表达数据,为进一步揭示NDV与宿主相互作用机制,NDV致病机理提供了有价值的信息。
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