产β-mannanase重组枯草芽孢杆菌的构建、耐酸性改造及发酵研究

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β-l,4-D-甘露聚糖酶(EC 3.2.1.78)是一类能够水解含有β-甘露糖苷键的甘露聚糖、甘露多糖的内切水解酶,是降解甘露聚糖的主要参与者,其在食品、医药、造纸、纺织、石油开采、生物技术以及饲料工业中都有应用。本课题从自然界中筛选到一株产β-甘露聚糖酶的菌株B10-02,利用基因工程技术将其β-甘露聚糖酶基因克隆到Bacillus. subtilis168菌株中进行了表达,构建了一株既高效表达又易于纯化β-甘露聚糖酶的重组菌株pMA5-manA2a/B. subtilis 168,在对β-甘露
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β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase EC 3.2.1.21,BGL),又名β-D-葡萄糖苷水解酶,是一类外切糖苷水解酶,能够催化某些低聚糖、多聚糖糖链末端的非还原性β-D-葡萄糖苷键水解,释放出葡萄糖单体以及相应的配基,其水解活性已被广泛应用于纤维素的降解。β-葡萄糖苷酶在拥有水解活性的同时,还具有转糖苷活性,在水解反应过程中,β-葡萄糖苷酶能催化释放出来的葡萄糖单体或配基转移到其他糖链受
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腈水合酶(Nitrile Hydratase EC 4.2.1.84,简称NHase)催化腈类的氰基成相应的酰胺基,可用于合成重要的化工原料丙烯酰胺、维生素尼克酰胺等;也可分解工业生产过程中产生的含氰废物,以减少其对环境的危害;还可用于腈纶纤维的表面改性,将腈纶表面的氰基转化成酰胺基,从而提高腈纶的润湿性及染色性能。随着腈水合酶在化工、食品、环保及纺织等领域的应用越来越广泛,腈水合酶的研究也日益深
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谷氨酸是世界上产量最大的发酵产品之一,在中国2010年谷氨酸及其盐产量达220万吨,占世界总产量的70%以上。L-谷氨酸是通过结晶的方法从发酵液中提取出来。发酵液里存在大量的杂质,某些与L-谷氨酸共存的杂质对其结晶产生显著的影响,本文研究了L-苯丙氨酸、硫酸铵、葡萄糖、L-乳酸对L-谷氨酸溶解度、谷氨酸成核、结晶速率以及晶习等的影响。实验表明,25℃时L-苯丙氨酸对L-谷氨酸溶解度没有影响;L-苯
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环糊精葡萄糖基转移酶(Cyclodextrin Glycosyltransferase,简称CGT酶,EC 2.4.1.19)能通过环化反应转化淀粉及相关基质合成环糊精。由于环糊精可与疏水性客体分子形成包合物,因此被广泛应用于食品、医药等领域。然而利用野生型CGT酶生产的均是α-、β-、γ-环糊精的混合物,需通过一系列的步骤才能从混合物中分离纯化出单一类型的环糊精,导致其生产成本高,限制了其大规模
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本文以一株能在胞外大量积累延胡索酸的德氏根霉(Rhizopus delemar NRRL1526)为研究对象,以提高延胡索酸产量为目标,研究培养基组分优化对延胡索酸积累量的影响。通过调节前培养培养基组分及培养温度,实现深层培养过程中德氏根霉菌体形态及颗粒直径的控制;通过在德氏根霉中过量表达丙酮酸羧化酶基因,调节丙酮酸节点代谢流向,实现了延胡索酸积累量的提高。本文主要研究成果如下:(1)在详细考察德
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角质酶可以去除植物表面的角质层,是一种功能多样的解酯酶,应用于纺织工业棉纤维的精练。纤维素结合结构域(cellulose-binding module, CBM)有利于酶分子和纤维素的高效结合,与纤维素的紧密结合能够使底物分子更接近酶活性中心进而提高了酶的催化力。本实验室对角质酶进行分子改造,成功构建了两种角质酶-CBM生产菌,分别为采用Ⅰ型分泌系统的重组菌:Tfu_0883-CBM-HlyAs/
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γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric acid,简称GABA),是谷氨酸(Glutamic acid,Glu)经谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,简称GAD)催化脱羧后的产物。GABA是一种天然的非蛋白质氨基酸,也是哺乳动物中枢神经系统中重要的抑制性神经递质,拥有重要的生理功能,如抗焦虑、降血压、精神安定、增强脑活力等,因此GABA作为一种保健因子可广泛地应用于食
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目前,粮食危机、能源安全和低碳经济问题是全世界所关注的三大主题。可再生的生物质资源可以替代化石能源,减少CO2的排放、促进低碳经济的实现。木薯是一种高产的“非粮”生物质作物,因其“不与人争粮、不与粮争地”的特征被推上了发展清洁、可再生能源的前沿。本论文在7 L静态发酵罐中,以“非粮”木薯为原料开展丁醇发酵,研究探索用木薯替代玉米进行丁醇发酵的可行性、存在的问题并提出解决问题的办法,为以木薯为原料的
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丁醇是一种重要的化工有机溶剂,也是一种极具潜力的新型生物燃料。利用糖质非粮原料替代玉米等粮食原料发酵生产丙酮丁醇既可以降低原料成本,又顺应国家新能源政策,对实现可再生资源的能源化具有重要的意义。本研究从实验室保藏的8株丙酮丁醇梭菌中筛选出一株能较好利用糖质原料的菌种C. saccharobutylicum DSM 13864进行糖蜜、木质纤维素水解液等糖质原料的丙酮丁醇发酵。优化获得了糖蜜的最优培
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