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背景与目的柴胡疏肝汤是本课题组根据癫痫“从肝论治”治疗理论组建的复方,由柴胡、黄芩、白芍等15味中药组成,具有疏肝、柔肝、养肝、平肝作用,现代研究表明,此方具有降低神经兴奋性、抗炎和调节机体免疫功能的作用。该方为附属医院中药房的协定处方,已在临床运用30余年,在癫痫预防和治疗上取得了确切疗效。中药质量的好坏与临床用药疗效及安全密切相关。目前柴胡疏肝汤尚未有相关质量控制研究,本文将采用高效液相色谱法对柴胡疏肝汤进行系统研究,建立柴胡疏肝汤指纹图谱,并对其主要成分含量进行测定,从整体和部分有效成分上对其质量进行全面控制,为临床用药安全及该方进一步研究提供理论依据。方法1.柴胡疏肝汤高效液相指纹图谱研究及其主要成分黄芩苷、汉黄芩苷、汉黄芩素、芍药苷、阿魏酸、甘草苷的含量测定。采用高效液相色谱法,二极阵列检测器,Agilent ZORBAX SB-C8色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),在检测波长210nm、柱温25℃下,进样量为10μL,以乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,检测时间为65 min。测定10批柴胡疏肝汤色谱图,评估柴胡疏肝汤整体质量的相似度,分析该方共有特征峰药物归属。在相同的色谱条件下,建立其多成分含量测定方法,为柴胡疏肝汤的质量控制提供依据。2.柴胡疏肝汤主要成分柴胡皂苷a、汉黄芩苷、芍药苷的含量测定。采用高效液相色谱法,二极阵列检测器,Agilent ZORBAX SB-C8色谱柱(250 mmx4.6mm,5 μm),在检测波长210nm、柱温25℃C下,进样量为10μL,以乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,检测时间为80 min。考察了柴胡皂苷a、汉黄芩苷、芍药苷的稳定性、重复性,测定其含量,为该方质量控制提供依据。结果1.建立了柴胡疏肝汤高效液相指纹图谱,10批样品的相似度较好均大于0.95。确定共有峰有22个,明确各峰所归属药材,其中7个色谱峰可明确化学成分。同时建立了能同时测定柴胡疏肝汤中主要成分芍药苷、黄芩苷、汉黄芩苷、汉黄芩素、阿魏酸、甘草苷含量方法。线性关系良好,平均加样回收率(n=9)均在 90～105%(RSD<3%)。2.建立测定柴胡疏肝汤中主要成分柴胡皂苷a、汉黄芩苷、芍药苷的含量方法,在24小时内稳定,重复性可,线性关系良好,平均加样回收率(n=9)均在90～105%(RSD<3%)。结论建立柴胡疏肝汤高效液相指纹图谱及含量测定方法,该方法重复性、稳定性可,线性关系、平均加样回收率良好,可以反映柴胡疏肝汤整体特性。为柴胡疏肝汤质量控制及进一步研究提供理论基础。