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1背景艾滋病是挑战人类健康最严重的疾病之一,至今全球约7000万人感染,近3000千万人因感染HIV病毒而死亡。我省又是艾滋病疫情高发省份之一,由于我省人口基数大,以及局部地区有爆发性感染,HIV感染者的绝对数很大,据河南省疾控中心数据,截至2014年10月31日,河南省累计确认艾滋病感染者59380例,累计死亡18962例,HIV感染者累计报告数已位列全国第二,我省艾滋病的防控形式依然不容乐观。随着HIV感染者的不断增加、感染人群的不断变化,艾滋病已成为最严重的制约我省政治、经济发展的公共卫生问题之一,人们对其相关性疾病也更加重视。弓形虫可寄生于人和温血类动物的有核细胞内,是HIV感染者较为常见的继发感染病原体,弓形虫脑膜炎也是艾滋病患者脑部发生病变的一种常见疾病,已成为AIDS患者死亡的主要原因之一。HIV是一种逆转录病毒,侵入机体后的增殖过程中机体的CD44+淋巴细胞遭到大量的破坏。当HIV感染到骨髓干细胞时,可抑制CD4+T淋巴细胞的生成,从而造成CD4+T淋巴细胞数量的进行性减少。HIV感染者CD4+T淋巴细胞下降并且导致机体的免疫功能受到损伤时,机体免疫力下降,不但容易受到弓形虫感染,而且患者体内隐性感染弓形虫的虫体也会被激活。并且弓形虫的感染本身就可以诱导免疫抑制,两者相互促进感染,形成恶性循环,最终导致艾滋病病人出现各种感染弓形虫的临床症状甚至死亡。2目的了解河南省HIV感染者弓形虫的感染状况,以及合并感染与CD4+T淋巴细胞和HIV病毒载量之间的关系,为艾滋病的预防控制和诊断治疗提供一些基本信息,对预防HIV的继发弓形虫感染、改善预后以及延长艾滋病病人生命、降低死亡率、提高艾滋病病人生命质量有着重要意义。3研究对象3.1实验组：河南省1038份经一步法(蛋白印记法)确证实验证实的HIV感染者外周血液标本。3.2对照组：河南省210份经ELISA法HIV初筛阴性的健康体检人员的外周血液标本。4方法4.1弓形虫IgG抗体检测对实验组和对照组的血清样品弓形虫IgG进行酶联免疫吸附试验检测,通过对两组弓形虫感染率的比较,验证HIV患者与非HIV患者之间弓形虫的感染率的是否存在差异,以及两种疾病感染之间的关系。4.2血液弓形虫DNA的检测建立单管一步法套式PCR的方法,扩增实验组和对照组血液标本的弓形虫529bp片段。通过两组弓形虫感染率的比较,验证HIV患者与非HIV患者之间弓形虫的感染率的是否存在差异,以及两种疾病感染之间的关系。4.3 HIV感染者血液中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数检测利用流式细胞仪提取并计算实验组HIV感染者外周血标本中CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+T淋巴细胞数各自所占的比例,然后将实验组分成两个小组,比较弓形虫检测阳性和阴性两组感染者之间的各个T淋巴细胞的数量是否存在差异,并用统计学的方法计算出弓形虫感染对HIV感染者的T淋巴细胞的影响。4.4 HIV感染者血液中病毒载量检测检测每个实验组HIV感染者外周血标本的HIV病毒载量,对各个数量级病毒载量标本弓形虫阳性率进行相关性和显著性分析,验证弓形虫感染对HIV患者的病毒载量是否有影响,以及两者之间的相互关系。4.5 HIV感染者感染方式与弓形虫PCR结果的相关性分析利用统计学方法分析HIV患者感染方式与弓形虫PCR结果之间相关性。5结果5.1弓形虫抗体检测：实验组1014份HIV感染者(1038个HIV感染者24人未采集到血清样品)弓形虫抗体阳性者41人,阴性者973人,阳性率为4.04%；对照组210份非HIV感染者弓形虫抗体阳性者10人,阴性者200人,抗体阳性率为4.76%。实验组HIV感染者和对照组非HIV感染者之间,血清中弓形虫感染阳性率(X2=0.224926,P=0.635312)没有显著性差异。5.2弓形虫PCR检测：HIV感染者弓形虫PCR阳性率为6.36%,非HIV感染者弓形虫PCR阳性率为8.09%(X2=0.848702,P=0.356920),两者之间没有显著性差异。5.3 HIV感染者血液中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数检测：HIV感染者弓形虫PCR阳性和阴性之间的CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数、以及CD4+/CD8+之间均无显著性差异。不同CD4+T淋巴细胞数区间弓形虫阳阴性之间无显著性差异。5.4 HIV感染者血液中HIV病毒载量检测：病毒载量<3log/mL、3-4log/mL 4-51og/mL、>5log/mL四个数量级所对应弓形虫IgG抗体检测阳性率(X2=2.032309,P=0.565728)和PCR检测阳性率(X2=6.192383,P=0.102616)无显著差异。随着CD4+T淋巴细胞数的增高,病毒载量呈下降趋势,用统计软件进行相关回归分析,CD4+T淋巴细胞数与病毒载量之间存在负相关(r=-0.36)5.5 HIV感染者感染方式与弓形虫PCR结果的相关性分析：同性性行为方式弓形虫感染率为8.9%,输血方式感染HIV弓形虫感染率为2.8%,两种感染途径之间(X2=6.346623,P=0.01176)具有显著性差异,其他HIV感染方式与弓形虫感染无显著性差异。6结论6.1本实验通过形虫IgG抗体和PCR两种方法对实验组HIV感染者和对照组非HIV感染者进行弓形虫感染率的检测并用软件统计进行分析,我省HIV感染者和非感染者感染弓形虫的概率之间没有显著性差异。与其他相关报道对比分析,我省非HIV患者的弓形虫感染率与前人的研究大体相同,而HIV患者的弓形虫的阳性率低于前人的研究。6.2对HIV感染者弓形虫感染情况与外周血CD4+T淋巴细胞数和HIV病毒载量进行统计分析显示：①感染了弓形虫对HIV患者的免疫系统的影响并不大,在对HIV患者的免疫系统的影响上AIDS依旧占主导地位；②HIV病毒在机体内的活跃程度并不是机体感染弓形虫的主要风险因素；③HIV感染者外周血CD4+T淋巴细胞数与病毒载量之间存在负相关。6.3通过对HIV感染者感染方式与弓形虫PCR结果的相关性分析显示除同性感染与输血感染之间具有显著性差异外,其他HIV感染方式与弓形虫感染无显著性差异,其感染率与HAART抗病毒治疗有关。6.4男男同性恋是HIV最主要的感染方式之一,同性感染与输血感染之间具有显著性差异的是CD4+T淋巴细胞数≥350个/μL这类人群。