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CircRNA是一类在生物体内普遍存在的内源性非编码RNA。近几年的研究表明,circRNA能够吸附miRNA从而间接调控基因表达,而miRNA已经被充分证实能通过作用于m RNA从而在植物生长发育和抵御生物及非生物胁迫中起重要的调节作用。番茄作为一种世界范围内广泛种植的双子叶茄科模式植物,晚疫病会给其生产带来较大的经济损失。另外目前还缺少番茄病害相关circRNA的报道,而且对其功能特性的分析,特别是对circRNA-miRNA-m RNA调控网络的研究还不系统。本研究挖掘到番茄中与病害密切相关的circRNA,并通过实验初步探究circRNA的功能,具体研究内容如下:首先,通过分析实验室前期所建的转录组数据库,挖掘到了68个番茄晚疫病相关的circRNA,其中存在27个下调表达circRNA和9个上调表达circRNA。结合基因表达量和亲本基因的GO功能注释结果,得到了2个与番茄晚疫病密切相关的外显子circRNA。之后构建了EcircRNA-miRNA的关系网络,通过对共同靶向的11个miRNA靶基因进行分析,初步筛选得到2个抗病相关miRNA作为后续实验对象,它们分别是miR477-3p和miR9478-5p。其次,将EcircRNA45和EcircRNA47作为本文的重点研究对象,釆用正向和反向引物对它们进行PCR验证,并通过实时定量PCR分析了二者的表达特性。发现它们在叶中的表达量均高于根和茎,且均能对晚疫病菌做出响应,并与miR477-3p、miR9478-5p的表达量呈负相关。另外通过菌处理后发现miR477-3p和mi R9478-5p均呈下调表达,而它们的靶基因则呈上调表达,表明circRNA能在番茄响应胁迫应答中通过吸附mi RNA而间接调控基因的表达。最后,为了进一步探究circRNA-miRNA的调控关系,本实验分别克隆了番茄中的EcircRNA45、EcircRNA47和MIR477-3p、MIR9478-5p基因,成功构建了相应的过表达载体并分别建立了四个瞬时表达体系。在过表达EcircRNA45和EcircRNA47的番茄叶片中miR477-3p和miR9478-5p的表达量显著下降且靶基因呈显著上调趋势。在过表达MIR477-3p和MIR9478-5p的番茄叶片中,靶基因则出现下调趋势。表明EcircRNA45、EcircRNA47能通过沉默miRNA,间接调控mRNA表达,从而在植病互作中发挥作用。总之,本研究通过生物信息学分析与实验相结合的手段,预测、挖掘及鉴定了番茄中与病害密切相关的circRNA,并对其进行了相关功能分析,加深了人们对植物与病原物互作中circRNA机制的了解。