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J 亚群禽白血病病毒（Avian leukosis virus Subgroup J ，ALV-J）是20世纪80年代末在英国发现并鉴定的一个禽白血病病毒（Avian leukosis virus ，ALV）亚群，它主要引起肉鸡的骨髓瘤白血病，给养禽业造成很大的损失。已知ALV-J的囊膜蛋白决定病毒的表型和病毒中和反应类型,其中由gp85基因编码的病毒囊膜表面糖蛋白(Surface Subunit，SU)决定病毒的亚群。本实验采用ALV-J特异性引物，用RT-PCR的方法从吉林省某种鸡场送检的种鸡体内，检出一株ALV-J病毒。遂将此ALV-J分离株命名为JL-2株。此株病毒通过CEF增殖后，提取宿主基因组作为PCR反应的模板，根据GenBank中多株ALV-J病毒基因的完整序列,利用Oligo 6.0软件设计了一对引物，扩增出包括gp85基因在内的大约1700bp核酸序列。将其插入克隆载体质粒pMD18-T中，构建了重组质粒pMD18-T- JL-2/env，并对克隆的env基因进行序列测定。结果表明，所测序基因中gp85基因全长924bp，编码308个氨基酸，分子量为34 Ku。计算机辅助分析表明，与ALV-J原型株HPRS-103相比，JL-2株病毒除了在585到595位核苷酸处出现9个核苷酸的插入外，整段基因比较保守。其中JL-2株的gp85基因与HPRS-103的相应部分的同源性为91.8％，氨基酸的同源性为86％。遗传分析表明，JL-2病毒株极有可能起源于美国的Adol-hc-1病毒株。本实验根据原核表达载体pGEX-6p-1的酶切图谱，设计了另一对引物，用细胞培养物提取的基因组为模板，扩增了前病毒gp85基因。将此段基因亚克隆到表达载体pGEX-6p-1上，转化大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导以后，表达出预计的60 Ku的融合蛋白，光密度扫描对表达产物进行初步定量表明，60 Ku融合蛋白占菌体总蛋白的31.8%。通过Western-blot实验对表达产物进行反应原性分析，结果表明所得融合蛋白具有较好的抗原反应特异性。本研究首次分离并鉴定了ALV-J地方分离株JL-2株病毒，克隆了JL-2株病毒gp85基因全序列，并与国内外参考毒株进行了比较分析。在此基础上，成功地表达了gp85基因，为国内ALV-J病毒的分子流行病学调查、分子诊断试剂的开发以及基因工程疫苗的研制提供了理论依据和物质基础。