目的观察健康志愿者含青蒿素(ART)或双氢青蒿素(DHA)血清能否抑制恶性疟原虫(Pf)FCC-1/HN裂殖体发育；试验FCC-1/HN与3D7对ART的敏感性,比较剂量与药效的关系,选择试验虫株；比较口服不同剂量ART或DHA后含药血清抑制恶性疟原虫裂殖体(PFS)形成的效价；初步试验复方ART血清的体外药效,评价半体外试验抑制PFS形成的影响；用体外微量法测定ART或DHA对PFS的最低抑制浓度当量。探索一种简易、敏感、重复性强的检测体内抗疟药药效的测定方法,为疟疾研究和抗疟复方研制提供参考。方法志愿者46人次半空腹口服ART类药,定时采血2-3ml,分离血清/血浆,低温冰箱保存；体外培养恶性疟原虫FCC-1/HN或3D7,在粗大环状体比较多时同步,制备疟原虫红细胞感染率0.2-1.0%左右的含虫血；含药血清与含虫血在37℃,5%CO2,饱和湿度的条件下共同孵育20-30h,在裂殖体破裂前取RBC涂厚血膜,晾干1-2天,染色,镜检。结果判断：油镜下观察对照孔裂殖体数(3个核以上)≥10%为测试有效；200个无性体范围内未见裂殖体为阴性。结果(1)健康志愿者含ART/DHA血清对FCC-1/HN裂殖体发育的影响：服青蒿素后1-2h2.5μl血清开始中断裂殖体的发育,药后2-4h药效达到高峰,服药8h后,20μl的血清仍然能抑制裂殖体的发育；服DHA后1h7.5μl含血清开始抑制裂殖体形成,服药4-6小时后,0.5μl的血清仍然能阻断裂殖体的发育,服药8h后,0.5-7.5μl还有抑制裂殖体发育的作用,显示作用更强劲。(2)FCC-1/HN与3D7对ART的敏感性试验：高剂量组FCC-1/HN裂殖体平均形成率：2h为0,4h为0.22%,6h为5.14%,8h为41.4%,12h为99.83%；中剂量组裂殖体平均形成率：2h为14.03%,4h为10.33%,6h为35.92%,8h为59.75%,12h为99.50%。高剂量组3D7裂殖体平均形成率：2h为0,4h为0.14%,6h为0,8h为1.28%,12h为28.22%；中剂量组裂殖体平均形成率：2h为0.53%,4h为0.81%,6h为0.72%,8h为8.53%,12h为52.81%。经统计学检验显示,3D7的敏感性更高,即同剂量的含药血清3D7的裂殖体形成率更低,FCC-1/HN的裂殖体形成率高。(3)ART与DHA对PFS形成的半体外试验：ART 2组共12例志愿者完成试验,药后1h仅1例血清(40μl)抑制PFS形成,药后2-4h有11例血清抑制PFS形成,志愿者药后血清抑制PFS形成的时间多数(9/12例)持续至药后8h,本次试验未见药后12h志愿者血清仍能抑制PFS形成；DHA2组共12例志愿者完成试验,药后1h有4例血清(3例60μl、1例10μ1)抑制PFS形成,药后2--4h有8例血清抑制PFS形成,药后志愿者血清抑制PFS形成的时间多数(8/12例)持续至12h以上。显示DHA药效更强。含ART与DHA的血清抑制试验的结果符合正态分布,以对倍稀释法在培养板每孔加入含药血清量的方法可以较好的检测含药血清的药效。(4)复方ART的半体外试验：在服药后2小时含复方ART血清/血浆都开始抑制PFS形成、药效持续时间都是到第15天、药效强弱等都显示复方ART血清／血浆效果基本一致,提示研究ART复方可以采用血清/血浆进行生物测定。复方ART由ART和哌喹组成,ART速效,药后2小时即抑制PFS发育,哌喹长效,抑制红内期疟原虫发育20多天；ART高效,服药后前2天的2-8h1.25-2.5%的含药血清就可以阻断PFS发育,2药合用有明显的协同作用；ART廉价,在疟区推广应用更加有利。(5)ART和DHA体外最低抑制浓度试验：ART完全抑制PFS形成在表3的第4孔,相对于药物质量浓度表的第4孔,即(?)31.25 ng/ml；而DHA完全抑制PFS形成在表3的第7孔,相对于药物质量浓度表的第7孔,且(?)3.47 ng/ml,可见本研究DHA3.47 ng/ml的药效大约相当于ART 31.25 ng/ml.经回归方程计算ART和DHA的半数抑制浓度(IC50)分别为18.51 nmol/L与3.18 nml/L.结论采用中药血清药理学与改良的体外微量法结合、以连续培养Pf检测药效的方法是可行的；此方法不需要大型高精尖的设备与技术,适用于比较贫困的疟区和普通实验室；以对倍稀释的方法在培养板每孔加入含药血清可以较好的检测含药血清的药效；采用廉价药物研制抗疟疾复方更加有利药物的推广应用。如果能找到合适的动物模型代替人,应用前景是肯定的。