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目的探讨红藤方对大鼠异位内膜生长的抑制作用及其含药血清对大鼠子宫内膜细胞生长特性的影响,以及对在位、异位子宫内膜组织和细胞培养上清液中基质金属蛋白酶表达的干预作用。
方法用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分成红藤方高、中、低(120g生药/kg、80g生药/kg、55g生药/kg)三个剂量组,达那唑高、中、低(80mg/kg、40mg/kg、20mg/kg)三个剂量组以及去势组和空白组共八组。测量灌胃前后内膜的体积,并取下异位内膜,作组织切片,观察内膜的组织学改变。选用SD成熟雌性大鼠建立大鼠子宫内膜细胞培养模型,用MTT比色法检测不同浓度不同处理方式的红藤方含药血清和达那唑含药培养液作用24h、48、72h和96h后对大鼠子宫内膜细胞生长的影响。采用明胶酶谱法对在位及异位子宫内膜组织中、以及不同含药血清的细胞培养上清液中MMP-2、-9的酶含量进行测定,酶活性由凝胶成像分析系统分析。
结果红藤方120g生药/kg、80g生药/kg组和达那唑80mg/kg、40mg/kg组及去势组均能明显抑制异位内膜的生长,且对子宫内膜异位症模型大鼠正常在位的子宫内膜也有一定的抑制作用(p<0.05)。子宫内膜异位症模型大鼠的在位和异位内膜组织中均有MMP-2和MMP-9的表达,红藤方120g生药/kg和达那唑80mg/kg组能显著抑制在位及异位内膜组织中MMP-2和MMP-9的活性(p<0.05),与去势组作用相当(p>0.05)。大鼠子宫内膜细胞培养实验证明,不同浓度含药培液培养大鼠子宫内膜细胞相应时间后,细胞的增殖活性随含药血清浓度升高而降低,呈明显的剂量依赖性,随作用时间延长而降低,具有明显的时间依赖性。明胶酶谱法仅检测到细胞培养上清液中有MMP-2的表达,未见MMP-9表达。红藤方Ⅰ号样品含药血清可显著抑制细胞培养上清液中的MMP-2活性,尤以10%未灭活组的作用最为显著(p<0.05)。
结论红藤方可显著抑制内异症大鼠异位内膜以及体外培养的内膜细胞的生长,并对MMPs活性的表达有一定的抑制作用。