核酸适体(Aptamer)以其高亲和性、高特异性,易合成,化学性质稳定,修饰灵活等优点被誉为“化学抗体”。它是一种可以识别多种靶标的短的单链核苷酸序列,通过“指数富集的配体系统进化”(SELEX)技术体外筛选得到。随着以细胞为靶标的SELEX技术的不断进步,越来越多肿瘤细胞的特异性核酸适体被筛选出来,为癌症的早期诊断和治疗提供了一种新型的分子探针。然而,要达到癌症早期诊断的目的,提高检测灵敏度仍然是最关键的问题之一。酪胺信号放大技术具有优越的信号放大能力,已广泛应用于原位杂交、酶联免疫、流式细胞术等领域。为提高细胞识别效率,发展简单、通用的癌细胞检测方法,本论文以肺癌A549细胞作为模式细胞,以核酸适体探针为特异性识别基元,酪胺信号放大技术(TSA)为信号放大基元,完成了以下工作：1、核酸适体介导的酪胺信号放大(Aptamer/TSA)固相分析技术用于A549细胞的识别研究瞄准核酸适体作为“诊断抗体”在癌细胞检测方面的巨大潜力,利用贴壁培养的A549细胞作为研究对象,发展了一种Aptamer/TSA固相分析技术用于肿瘤细胞检测。TSA法是一种基于催化沉积的信号放大方法,在固相免疫反应中可以使信号得到几何级数的放大。本方法结合了核酸适体探针高特异性、高亲和力的特点和TSA技术优越的放大能力,分别以体外培养和原代培养A549细胞为目标细胞,用于缓冲液和血清中的有效识别,方法简单,特异性强,结果直观。与传统荧光染料标记的核酸适体探针相比信号增强约110倍。Aptamer/TSA司相分析技术对A549细胞的微小生理变化具有强抗干扰能力,显示出优越的环境适应性,有望在肺腺癌的临床检测中发挥重要作用。2、量子点作为报告探针的Aptamer/TSA固相分析技术用于A549细胞的识别研究TSA技术的信号基团主要是荧光染料分子,面临荧光不强、易光漂白等问题。量子点作为一种优异的荧光纳米材料,具有荧光强度高、抗光漂白能力强等优点,基于此发展了量子点作为报告探针的Aptamer/TSA固相分析技术,实现了对A549细胞的特异性标记成像。与量子点结合核酸适体的非TSA标记方法相比,信号增强约2.5倍,这与Strepavidin-FITC作为报告探针的方法(信号增强约110倍)相比有较大差距,但是在抗光漂白方面,量子点作为报告探针具有明显优势。3、Aptamer/TSA均相分析技术用于A549细胞的识别及高灵敏检测研究为了拓展Aptamer/TSA法的应用范围并且实现癌细胞的定量分析,本工作结合流式细胞术,发展了一种Aptamer/TSA均相分析技术用于A549细胞悬液的特异性识别及高灵敏检测。在缓冲液及血清中实现了A549细胞的定量分析,检测下限分别为100个和125个。与荧光显微术法相比,本方法缩短了检测时间、提高了检测效率,证实了Aptamer/TSA法用于悬浮癌细胞检测的可操作性,有望发展成为一种通用的方法用于多种肿瘤细胞的快速与高灵敏检测。