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目的:肿瘤组织的分化程度是决定胃癌预后的重要因素,本研究检测胃癌组织中SOX2和OCT4的表达,并探讨其与胃癌患者临床病理因素及预后的关系及意义。并诱导生成过表达SOX2的SGC7901-hSox2细胞株。研究过表达SOX2影响胃癌细胞生物学特征的表现和分子机制。方法:1.通过荧光定量PCR、Western-bloting、免疫组化技术检测60例不同分化程度的胃癌组织与正常胃粘膜组织中SOX2和OCT4的mRNA和蛋白的表达情况。2.分析SOX2和OCT4基因的表达水平与患者临床病理参数的关系。3.构建含SOX2基因的质粒载体,将慢病毒感染SGC-7901培养得到稳转株SGC7901-hSox2细胞。4.各种细胞功能试验,如Transwell细胞侵袭实验、细胞划痕实验、细胞耐药实验,裸鼠体内成瘤实验,依次检测过表达SOX2对胃癌细胞生物学特性的影响。5.荧光定量PCR、western–bloting检测过表达SOX2的胃癌细胞中PI3K/Akt信号转导通路调控基因PTEN及干性标记基因的表达变化。结果:1.荧光定量PCR、Western-bloting检测显示,高分化胃癌组织SOX2 mRNA和蛋白的相对表达量与正常胃黏膜组织比较差异无统计学意义(t=0.1033,P>0.05,t=0.116,P>0.05),但显著高于中分化胃癌组织(t=12.48,P<0.05,t=22.78,p<0.05)和低分化胃癌组织(t=17.56,p<0.05,t=30.00,p<0.05),差异有统计学意义。高分化胃癌组织oct4mrna和蛋白的相对表达量与正常胃黏膜组织比较差异无统计学意义(t=2.436,p>0.05,t=1.064,p>0.05),但显著低于中分化胃癌组织(t=13.23,p<0.05,t=25.56,p<0.05)和低分化胃癌组织(t=12.10,p<0.05,t=69.48,p<0.05),差异有统计学意义。2.免疫组化显示高分化胃癌组织中sox2的阳性表达率(10/21)高于中分化胃癌组织(7/20)和低分化胃癌组织(2/19)(p<0.05),高分化胃癌组织中oct4的阳性表达率(2/21)低于中分化胃癌组织(6/20)和低分化胃癌组织(12/19)(p<0.05)。3.与临床病理参数相比较,胃癌中sox2,oct4蛋白的表达与患者的性别、年龄无关,无统计学差异(p>0.05)。与病理分期、浸润程度、淋巴结转移数目相关(p<0.05)。4.成功诱导得到胃癌细胞稳转株sgc7901-hsox2,transwell细胞侵袭实验提示sgc7901-hsox2组与sgc7901组、sgc7901-zpp组相比较,细胞的穿膜能力显著减弱(t=18.58,p<0.05,t=18.19,p<0.05)。细胞划痕实验表明sgc7901-hsox2组的迁移能力低于空白、对照组(t=2.999,p<0.05,t=4.635,p<0.05),细胞耐药实验结果为:sgc7901-hsox2组对l-ohp和5-fu的ic50均低于对照、空白组(p<0.05),裸鼠成瘤实验提示:sgc7901-hsox2组细胞的致瘤性较空白、对照组降低(t=9.204,p<0.05,t=15.78,p<0.05)。5.荧光定量pcr、western–bloting实验结果示:sgc7901-hsox2组细胞的pi3k-akt信号通路的调控基因pten相对表达水平与空白、对照组相比明显升高。差异具有统计学意义(p<0.05)。然而过表达基因sox2的胃癌细胞中干细胞表面标记物oct4、c-myc、cd44无明显变化(p>0.05)。结论:1.不同分化程度胃癌组织的sox2表达水平不同,分化程度越高,sox2表达水平越高,提示sox2在胃上皮细胞的分化过程中起了明显的作用,在胃癌的演变过程中具有抑癌基因的功能。2.胃癌组织分化程度越低,oct4的mrna及蛋白的表达量越高,低分化胃癌组织的OCT4表达水平明显高于中、高分化胃癌组织,OCT4基因的表达与胃癌细胞的分化程度密切相关。3.SOX2基因的低表达水平和OCT4的高水平表达可能促进胃癌的进展和侵袭,有望成为胃癌临床诊断、治疗和愈后生存期的一个指标。4.过表达SOX2胃癌细胞的侵袭迁移、增殖能力及致瘤性明显降低,5.SOX2可能通过PTEN下调PI3K/AKT信号通路来改变胃癌细胞的生物学特性。