假单胞菌催化芳香硫醚和芳香酮的不对称氧化还原反应研究

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目的:探索假单胞菌催化芳香硫醚的不对称氧化反应及芳香酮不对称还原反应的生物催化研究。方法:运用整细胞生物转化法,以苯甲硫醚和4-二氢色原酮作为模板底物进行筛选,对生物催化反应体系进行优化,构建高效的不对称氧化和还原反应过程,探索其底物普适性,生物催化产物使用HPLC、NMR、旋光仪、液质联用等仪器进行表征。结果:1.以苯甲硫醚作为模板底物进行筛选,对反应条件进行了优化,在细胞浓度为10 g cdw/L,底物浓度为30 mM,反应体系pH值为7.0,反应温度为30℃反应24 h,底物的转化率和产物的e.e.值达到99%,通过延长反应时间到48 h发现无过度氧化产物砜的生成,辅溶剂的加入对整细胞的催化活性有较大的影响,对不同底物进行拓展,获得54%-99%的产率和63%-99%e.e.值的R构型手性亚砜产物。2.意外发现改变培养条件假单胞菌显现出较强的还原活性,以4-二氢色原酮作为模板底物进行筛选,在细胞浓度为40 g/cdw,5 mM底物浓度,反应体系pH值为8.0,反应温度为30℃情况下反应24 h,转化率达98%,产物4-二乙酰醇的e.e.值达99%;丙三醇作为辅溶剂可提高转化效率,但其它辅溶剂依然显示了细胞毒性。通过对不同底物的拓展,分别获得87%-99%的产率和65%-92%e.e.值的S构型手性醇产物。结论:1.Pseudomonas monteilii M2013683在以M9培养基培养条件下,整细胞能有效的催化苯甲硫醚的不对称氧化反应,对其他硫醚底物仍然可以获得54%-99%的产率和63%-99%e.e.值的R构型手性亚砜产物。2.Pseudomonas plecoglossicida ZMU-T06在以LB培养基培养条件下,可以实现芳香酮类底物的不对称还原反应,获得87%-99%的产率和65%-92%e.e.值的S构型手性醇产物。
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