【摘 要】
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蒲公英（拉丁学名为Taraxacum mongolicum Hand-Mazz）别名蒲公草、婆婆丁等,被2015版《中国药典》收载为菊科植物蒲公英。蒲公英在临床方面应用广泛,主要表现在抑菌、消炎止痛、抗病毒、抗肿瘤、抗癌等方面,尤其在抑菌消炎方面应用较多且效果良好。本研究以蒲公英为原材料,分别采用热水浸提、80%酒精浸提和乙醚索氏提取等一系列方法分离纯化得到7种蒲公英样品（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ和
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蒲公英（拉丁学名为Taraxacum mongolicum Hand-Mazz）别名蒲公草、婆婆丁等,被2015版《中国药典》收载为菊科植物蒲公英。蒲公英在临床方面应用广泛,主要表现在抑菌、消炎止痛、抗病毒、抗肿瘤、抗癌等方面,尤其在抑菌消炎方面应用较多且效果良好。本研究以蒲公英为原材料,分别采用热水浸提、80%酒精浸提和乙醚索氏提取等一系列方法分离纯化得到7种蒲公英样品（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ和Ⅶ）,并筛选出对白假丝酵母菌（C.albicans）、加德纳菌（G.vaginalis）和金黄色葡萄球菌（S.aureus）有抑菌效果的活性成分,在此基础上采用高效液相色谱（HPLC）、超高效液相色谱质谱联用仪（UPLC-MS/MS）和气相色谱质谱联用仪（GC-MS）对蒲公英提取物进行分析鉴定,通过分析提取物对C.albicans和G.vaginalis的最低抑菌浓度、细胞超微结构、抑菌动力学、细胞膜通透性和细胞壁葡聚糖合成的影响,研究了蒲公英提取物对C.albicans和G.vaginalis的抑菌机理。主要研究结果如下:（1）样品Ⅰ、样品Ⅱ、样品Ⅲ、样品Ⅳ、样品Ⅴ、样品Ⅵ和样品Ⅶ的得率分别为0.4679%、0.0198%、0.0195%、0.0191%、0.0246%、0.0221%和2.8667%。在7种蒲公英提取物中,蒲公英样品Ⅰ对C.albicans、G.vaginalis和S.aureus均有较强的抑菌能力,样品Ⅶ对S.aureus有较强的抑菌能力。（2）HPLC结合UPLC-MS/MS结果表明,HPLC从蒲公英样品Ⅰ中分离出来8种酚类化合物,峰1,峰2,峰3,峰4,峰5和峰6依次为4-香豆酸,阿魏酸,槲皮素戊糖苷,3,5-二-O-咖啡酰奎尼酸,4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和木犀草素,而峰7和峰8为未知化合物,它们的相对百分含量分别为11.45%,3.96%,10.48%,34.24%,3.91%,11.80%,3.65%和4.21%,其中,3,5-二-O-咖啡酰奎尼酸是样品Ⅰ中含量最高的化合物。GC-MS结果表明,蒲公英样品Ⅶ中含有36种化合物,含量较高的成分依次为9,12,15-十八烷三烯酸（Z,Z,Z）（27.69%）,9,12-十八烷二烯酸（Z,Z）（19.99%）,十六酸（15.54%）,3,7,11,15-四甲基-2-十六烷烯-1-醇（9.72%）,菜油甾醇（6.20%）和十八酸（3.99%）,6种物质相对含量的总和占样品Ⅶ的73.42%。（3）蒲公英样品Ⅰ对C.albicans和G.vaginalis的最低抑菌浓度值（MIC）均为32.0mg/m L。扫描电镜结果表明,样品Ⅰ可破坏C.albicans和G.vaginalis细胞膜的完整性,使细胞内物质泄漏,细胞代谢发生紊乱。抑菌动力学研究表明,样品Ⅰ对C.albicans和G.vaginalis的抑制作用主要是作用于其指数期的生长,从而使其生长速度大幅度的降低。细胞膜通透性研究表明,样品Ⅰ增大了C.albicans和G.vaginalis细胞膜的通透性,使得C.albicans和G.vaginalis内部的核酸大量外泄,从而影响了C.albicans和G.vaginalis的代谢和生长。通过红外光谱分析显示,可能是样品Ⅰ对C.albicans细胞壁β-（1-3）-D葡聚糖糖苷键的破坏而改变了其细胞壁结构,最终抑制了细胞生长。因此,蒲公英样品Ⅰ能够破坏C.albicans和G.vaginalis菌体细胞膜,可能还影响了C.albicans细胞壁葡聚糖的合成,进而使细胞生长受到抑制,最终导致其死亡。
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