Vero细胞广泛应用于疫苗生产中。由于疫苗中Vero细胞DNA残留可能存在着对人体致肿瘤性风险,且DNA残留量越高、DNA片断越大,这种风险性越高。因此,在疫苗生产过程中如何降低疫苗中Vero细胞的DNA残留量,保证疫苗质量具有重要意义。目前多数狂犬病疫苗生产厂家应用Vero细胞作为病毒培养载体繁殖病毒,收获病毒液后普遍通过超滤浓缩、分子筛层析等纯化工艺进行纯化,制品中DNA残留去除效果不理想。为此,在病毒浓缩、纯化过程中,技术人员对病毒液浓缩倍数、分子筛过程中柱效、上样量、洗脱液中相关盐的成分配比及pH、洗脱液流速等条件和相关参数进行多方面的调整尝试,从结果来看,仍不能从根本上解决疫苗中Vero细胞DNA残留超标的问题。本课题从病毒培养阶段开始,通过对培养条件进行优化,调整细胞的生长状态,在提高病毒收获液滴度的同时,尽量减少细胞脱落和破碎,降低病毒液中Vero细胞DNA释放量；选择合适孔径的超滤膜包,在超滤过程中确保抗原不损失的前提下有效透除部分残余DNA和牛血清蛋白,减少后期进一步去除DNA的纯化难度；增加阴离子交换柱工艺,筛选能较好吸附残余DNA的阴离子交换介质的同时,减少抗原损失,以期达到《中国药典》第三部规定的质量要求。实验结果显示,优化培养条件、选用300KD超滤膜效果显著,使用阴离子交换柱虽可使DNA残留进一步显著下降,但抗原损失相对较大。结果提示应进一步优化离子交换条件,在降低DNA的同时,减少抗原损失,提高抗原收获率。