【摘 要】
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目的:通过将大鼠嗅球成鞘细胞(OECs)与VitroGel~(TM)3D-RGD水凝胶联合移植治疗大鼠完全横断脊髓损伤(SCI),观察大鼠后肢运动功能及组织恢复情况,研究OECs与VitroGel~(TM)3D-RGD水凝胶联合移植是否对大鼠SCI恢复有促进作用。方法:将嗅球成鞘细胞与VitroGel~(TM)3D-RGD水凝胶在体外共同培养,分别在1d、3d、7d
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目的:通过将大鼠嗅球成鞘细胞(OECs)与VitroGel~(TM)3D-RGD水凝胶联合移植治疗大鼠完全横断脊髓损伤(SCI),观察大鼠后肢运动功能及组织恢复情况,研究OECs与VitroGel~(TM)3D-RGD水凝胶联合移植是否对大鼠SCI恢复有促进作用。方法:将嗅球成鞘细胞与VitroGel~(TM)3D-RGD水凝胶在体外共同培养,分别在1d、3d、7d进行Live/Dead细胞染色,检测细胞活力。通过活性鉴定,筛选最佳共培养时间的细胞进行动物实验。其中VitroGel~(TM)3D-RGD水凝胶在扫描电镜下观察水凝胶内部结构。动物实验选用成年SD雄性大鼠,以大鼠T10脊髓节段做完全横断损伤模型,共分为假手术组、脊髓损伤模型组、OECs移植治疗组及OECs/VitroGel~(TM)3D-RGD水凝胶共同培养移植组,每组12只,分别于治疗前、术后1d、3d、7d、14d观察,并于28d观察后处死。采用大鼠后肢运动功能BBB评分、HE染色、免疫组化及透射电镜评估大鼠脊髓损伤恢复情况。结果:(1)OECs/VitroGel~(TM)3D-RGD水凝胶共培养细胞活性良好,在第3d时细胞状态最佳,但在第7d时细胞间明显相互连接形成轴突。(2)OECs/VitroGel~(TM)3D-RGD水凝胶具备良好的生物相容性,透射电镜下见众多疏散的空洞结构。(3)术前所有动物的BBB评分均达到21分,术后OECs/VitroGel~(TM)3D移植组大鼠的后肢BBB评分与其他组有统计学意义。(4)28d时,HE染色结果表明,OECs/VitroGel~(TM)3D-RGD移植组组织水肿消失,空泡变性减轻,神经细胞在灰质中分布均匀、形态正常,白质内神经纤维排列整齐。(5)免疫组化结果显示,OECs/VitroGel~(TM)3D-RGD移植组的5-HT、NF表达显著升高。(6)透射电镜下,OECs/VitroGel~(TM)3D-RGD移植组见SCI中心部位神经组织超微结构完整,仅少量纤维胶质瘢痕形成。结论:1、大鼠嗅球成鞘细胞在与VitroGel~(TM)3D水凝胶的体外共培养中表明,凝胶具有良好的生物相容性以及可以促进OECs间的细胞连接及轴突再生。2、VitroGel~(TM)3D/OECs联合移植治疗相较于其他组可以显著促进神经元再生及神经纤维形成,减少胶质瘢痕,促进SCI修复。
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