【摘 要】
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不论是作为模式动物在科研领域的贡献,或是作为蛋白质肉类满足人们的日常需求,鸡遗传学在贡献新知识和满足全球食品需求方面有着悠久的历史和良好的前景。为了适应现代商业化生产,如何高效获得种公鸡优良品质的雄性生殖细胞就成了关键技术之一。胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)是干性最高的一类细胞,原则上体内其他各类细胞都可以由它分化而来,当然也包括雄性生殖细胞。ESCs向雄性生殖细
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不论是作为模式动物在科研领域的贡献,或是作为蛋白质肉类满足人们的日常需求,鸡遗传学在贡献新知识和满足全球食品需求方面有着悠久的历史和良好的前景。为了适应现代商业化生产,如何高效获得种公鸡优良品质的雄性生殖细胞就成了关键技术之一。胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)是干性最高的一类细胞,原则上体内其他各类细胞都可以由它分化而来,当然也包括雄性生殖细胞。ESCs向雄性生殖细胞的分化过程受到诸多因素的协同调控,因此只有分别阐明这些调控因素在雄性生殖细胞分化中的调节机制,建立有效的体外诱导分化体系,才有从根本上有效提高雄性生殖细胞的体外生成效率。MicroRNAs(miRNAs)能够参与机体内生理和病理众多过程,是一类非常重要的调控因子,随着越来越多的miRNAs被发现,其在生殖细胞进程中的作用也逐渐被重视起来。本实验前期筛选出在RA(Retinoicacid)体外诱导ESCs向SSCs(Spermatogonial stem cells)分化过程中差异性表达的miR-302d,本文分别在体内外水平对其进行了功能验证,筛选并验证其靶基因Tle4的功能,探究miR-302d对生殖细胞分化相关Wnt信号通路中关键基因的影响,并初步探索miR-302d、互作LncRNA-341和靶基因Tle4三者之间的关系。结果表明,LncRNA-341能够竞争结合miR-302d,抑制miR-302d对Tle4的靶向结合,从而上调Tle4的表达,进而调节Wnt信号通路上相关节点基因的表达,来促进鸡体内外SSCs的形成。该研究为后续利用miRNAs诱导ESCs向雄性生殖细胞分化、建立稳定高效的体外诱导分化培养体系和获得高质量的雄性生殖细胞提供实验支持。
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