肝脏特异基因LZP的克隆及初步功能研究

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本研究首次从人、大鼠、小鼠中克隆了一个肝脏特异表达的新基因LZP。人LZP cDNA长2255bp,包含一个1635bp的开放阅读框,编码545个氨基酸。LZP基因位于人10号染色体长臂21区3带,长约40kb,包含9个外显子和8个内含子。小鼠LZP基因定位在10号染色体B4区,由9个外显子组成,编码2个剪接本;大鼠LZP基因定位在20号染色体长臂13区,有10个外显子。人、小鼠、大鼠LZP蛋白高度同源,同源度超过了93%。生物信息学分析表明LZP蛋白含有多个结构域,在其N端是一段信号肽,紧随其后的是3个EGF-like结构域,C端则是占了整个蛋白几乎一半的透明带结构域。基因和蛋白序列已提交至GenBank,登录号分别为AY013707(人LZP),AF356506(小鼠LZP variant Ⅰ),AY180915(小鼠LZP variant Ⅱ),以及AY353853(大鼠LZP)。 Northern杂交显示LZP基因是一个肝脏特异表达的基因,在所有被检测的组织中(人23种组织,小鼠8种组织),只在肝脏中检测到LZP基因的表达。而原位杂交实验进一步显示LZP基因是在肝细胞中表达的。LZP基因在小鼠胚胎发育早期就开始表达,其表达甚至早于肝脏分化。尽管主要定位于肝脏细胞核膜上,LZP蛋白也可以分泌到血液里。LZP基因在肝癌组织中,无论是mRNA水平还是蛋白水平的表达量均显著下降,而这种表达量的下降至少在部分病人中与LZP基因启动子甲基化水平的加强有密切的关系。然而,LZP表达质粒转染肝细胞株L02及SMMC-7721,得到稳定表达LZP蛋白的克隆,其增殖、细胞周期、凋亡较对照都没有发生显著变化,提示LZP基因表达水平的下降在肝癌发生中可能并不起非常重要的作用。 总之,现阶段得到的数据提示LZP蛋白作为一个肝脏特异蛋白,可能在肝脏的功能及发育中起重要的作用。而且在几乎所有己检测的肝癌病人中LZP都显著下调,加之能够分泌到血液中,便于检测,因此有望成为新的肝癌临床检测指标。
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