【摘 要】
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目的构建mi R-210的慢病毒载体(Lenti-mi R-210-Luciferase),然后转染人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,h PDLSC)后,检测成血管因子低氧诱导因子-1α(h
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目的构建mi R-210的慢病毒载体(Lenti-mi R-210-Luciferase),然后转染人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,h PDLSC)后,检测成血管因子低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在h PDLSCs的表达。方法在体外分离培养h PDLSC,构建慢病毒载体Lenti-mi R-210-Luciferase(Lenti-Lac Z-Luciferase为对照组),检测慢病毒滴度后,将慢病毒转染h PDLSCs,通过q PCR和细胞免疫组织化学法来检测HIF-1α及VEGF的表达。结果用Lenti-mi R-210-Luciferase转染h PDLSCs,0、1、4、7和14 d后q PCR检测,结果表明转染后的第4 d,HIF-1α和VEGF明显过表达,HIF-1α在第7天达到峰值,第14天时仍处于较高水平;VEGF直到第14d仍有上升趋势。细胞免疫组织化学结果是:mi R-210转染PDLSC后,抗HIF-1α和抗VEGF染色呈阳性,对照组呈阴性。结论成功构建了慢病毒载体Lenti-mi R-210-Luciferase,并证明了miR-210具有促进PDLSCs血管向分化的作用。
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