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目的:探讨实验性自身免疫性肌炎(EAM)动物模型制作方法,观察灵孢多糖对实验性自身免疫性肌炎的疗效。
方法:将实验用SD大鼠分为3组,A组8只为对照组,B组和C组为模型组,B组16只,为常用剂量组,C组16只,为加大剂量组。采用豚鼠骨骼肌的肌匀浆球蛋白(分别为20mg/ml、35mg/ml)加完全弗氏佐剂以不同浓度多次免疫各组SD大鼠,A组免疫物为生理盐水加等量的CFA,B组免疫物为20mg/ml的肌匀浆加等量的CFA,C组为35mg/ml的肌匀浆加等量的CFA制成实验性多发性肌炎的模型,观察其临床表现、肌酶谱、肌电图及骨骼肌的病理改变。将造模成功的SD大鼠分为三组,E组6只为对照组,F组10只和G组10只为实验组。给予E组生理盐水1ml/次/周腹腔注射,连用4周;F组地塞米松1mg/次/天腹腔注射,连用3周;G组灵孢多糖0.4ml/次/天肌肉注射,连用5周,注射部位为肌肉受累最重处,治疗实验性自身免疫性肌炎动物并通过临床症状评分及病理改变分级评价灵孢多糖对实验性自身免疫性肌炎的治疗作用。
结果:1.模型C组于免疫注射第3周左右开始出现活动减少,倦怠嗜卧,食欲体重下降等表现,模型B组有15只SD大鼠于免疫注射第4~5周出现上述症状,较C组为轻;模型组肌酶谱中,肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)与对照组比较明显升高(P<0.05),模型C组较模型B组升高更显著(P<0.01);模型组肌电图时限缩短,波幅降低,多相波增多;模型B组有10只,模型C组全部大鼠骨骼肌出现病理改变,表现为横纹肌局灶性分布的肌纤维变性炎细胞浸润,间质小血管壁增厚、扩张。2.根据临床症状评分及病理改变分级的数据分析灵孢多糖对实验性自身免疫性肌炎具有一定的疗效。
结论:1.EAM模型的各种临床特征与人类多发性肌炎相似;免疫机制与多发性肌炎发病有关;适当的加大抗原免疫剂量可以获得更为典型的动物模型和更高的制模成功率;本研究采用的造模方法可作为研究人类多发性肌炎的一个重要手段;可为阐明其发病机制及治疗提供科学的理论依据。2.灵孢多糖(GLPS)对实验性自身免疫性肌炎具有一定的疗效。