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目的:通过对化疗致POF大鼠模型的不同时期和动情周期的不同时段,给予左、右归丸干预,探讨该疗法对POF模型大鼠卵巢GDF-9mRNA表达影响的时效差异及内在机制。 方法:采用环磷酰胺(CTX)化疗致POF模型。通过大鼠阴道脱落细胞涂片,建立动情周期档案,遴选动情周期规律的大鼠纳入实验。实验共三部分,每部分包括:空白组、模型组、左归丸组、右归丸组、左右归丸组、雌孕激素组,共6组,每组10只。第一部分(早期干预):于造模当日,同期灌服实验药物。空白组和模型组每日灌服生理盐水;左归丸组和右归丸组分别于化疗同期灌服左归丸、右归丸混悬液;左右归丸组于动情期前2日灌服左归丸混悬液,动情期后2日灌服右归丸混悬液,动情间期不用药;雌孕激素组于动情期前2日及动情期后2日灌服戊酸雌二醇混悬液,同时在动情期后2日加用醋酸甲羟孕酮混悬液,以此循环用药15天。第二部分(早期合后期干预):前期造模及用药,方法同第一部分,第16天各组停用CTX,继续灌服实验药物20天。第三部分(后期干预):采用CTX造模成功后,给予实验药物连续干预20天,用药方法同第二部分后期。末次给药后将处于动情间期第2日或第5日尚未出现明显规律动情周期的大鼠处死,检测卵巢GDF-9mRNA的表达水平。 结果:大鼠卵巢GDF-9mRNA表达量比较。1.各部分组内比较:①早期干预部分:与空白组比较,均有非常显著性差异(P<0.01);左归丸组和左右归丸组与模型组比较均有显著性差异(P<0.05),雌孕激素组与模型组比较有非常显著性差异(P<0.01);右归丸组与雌孕激素组比较有显著性差异(P<0.05)。②早期合后期干预部分:模型组、左归丸组和右归丸组与空白组比较均有非常显著性差异(P<0.01);左归丸组和右归丸组与模型组比较均有显著性差异(P<0.05),雌孕激素组、左右归丸组与模型组比较均有非常显著性差异(P<0.01);左归丸组和右归丸组与雌孕激素组比较均有显著性差异(P<0.05)。③后期干预部分:与空白组比较,均有非常显著性差异(P<0.01);雌孕激素组和左右归丸组与模型组比较均有显著性差异(P<0.05)。2.各部分治疗组间比较:早期干预雌孕激素组、左右归丸组和后期干预左归丸组、右归丸组、左右归丸组分别与早期合后期干预部分相应组比较均有显著性差异(P<0.05),后期干预雌孕激素组与早期合后期干预雌孕激素组比较有非常显著性差异(P<0.01);早期干预雌孕激素组、左右归丸组和早期合后期干预左归丸组、右归丸组、左右归丸组分别与后期干预部分相应组比较均有显著性差异(P<0.05),早期合后期干预雌孕激素组与后期干预雌孕激素组比较有非常显著性差异(P<0.01)。 结论:左归丸、右归丸早期应用能够缓解化疗对卵巢的毒性损害,上调POF大鼠卵巢GDF-9mRNA的表达,进一步明确了POF发生与发展的调控环节,不仅为临床早期防治POF提供有效方案,也为中药逆转POF提供实验依据。