福建省枳椇种质资源遗传多样性的RAPD和ISSR分子标记分析

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:punk123456
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
枳椇(Hovenia acerba)是一种珍贵的经济树种,它集材、果、药、观赏于一身,生长快,适应性强,极具开发价值。枳椇种质资源的遗传多样性研究是开发利用枳椇资源中一个不可或缺的重要环节。本研究利用RAPD和ISSR两种分子标记方法,对福建省12个种源地35份枳椇材料进行遗传多样性研究,分析这些种质资源之间的亲缘关系,旨在为开发利用枳椇资源、筛选优良种源、杂交育种等工作提供一定的理论依据?疚难芯?结果如下:(1)建立并优化了适合于枳椇遗传多样性分析的RAPD和ISSR反应体系。确立了RAPD最佳反应体系为:反应总体积25μl,10×Ex Taq Buffer(Mg2+plus)2.5μl,dNTP Mixture200μmol/L,引物0.5μmol/L,DNA模板25ng,Ex Taq酶1.5U,ddH2O 17.95μl。程序:预变性94℃5min,变性94℃1min,退火36℃1min,延伸72℃2min,45个循环,最后延伸72℃10min。确立了ISSR最佳反应体系为:反应总体积25μl,10×Ex Taq Buffer(Mg2+plus)2.5μl,dNTP Mixture 375μmol/L,引物0.4μmol/L,DNA模板75ng,Ex Taq酶1U,ddH2O 14.55μl。程序:预变性94℃5min,变性94℃30s,退火50℃1min,延伸72℃90s,共35个循环,最后延伸72℃7min。(2)分别从50个RAPD随机引物和50个ISSR引物中各筛选出10个扩增强、重复性好、带型清晰的引物进行扩增。10个RAPD引物共检测了基因组DNA中193个位点,其中多态性位点有161个,占扩增总位点数的83.42 %。每个引物扩增的位点数一般在13 - 27个之间,平均为19.3个。10条引物在35个材料中共扩增出3956条条带,每个引物在每个各材料中的扩增的条带数一般在3 - 19条,平均为11.3条。10个ISSR引物共检测了基因组DNA中175个位点,其中多态性位点有155个,占扩增总位点数的88.57 %,比RAPD高出了四个百分点。每个引物扩增的位点数一般在15 - 23个之间,平均为17.5个。10个引物在35个材料中共扩增出2910条条带,每个引物在每个材料中的扩增的条带数一般在3 - 15条,平均为8.3条。将任一扩增带看作一个性状,按带的有无列出二元数据矩阵,假定处于哈迪-温伯格平衡(Hardy - Weinberg Equilibrium)下,计算出观测等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、Shannon多样性指数(I)、Nei’s基因多样性(H),群体总基因多样性(Ht)、群体内基因多样性(Hs)、基因分化系数(Gst)、基因流(Nm),Nei’s(1972)遗传距离与遗传相似性,并根据Nei’s(1972)遗传距离进行UPGMA聚类分析,构建各材料基因型之间亲缘关系树状图。分析表明,RAPD与ISSR两种分子标记方式都能较好地反映枳椇种质资源的遗传差异,揭示其遗传多样性。供试的福建省12个种源地35份枳椇材料存在着丰富的遗传多样性。研究结果对福建省枳椇种质资源的开发利用、杂交育种等提供了分子水平的理论依据。
其他文献
地被菊是近年来兴起的一个菊花新品种群,具有植株矮小、花期长、花型紧密等观赏特性,同时也具有较强的抗寒、抗旱、耐盐碱等优势。越来越多的学者利用分子生物学技术,将抗性因子
期刊
草地早熟禾(Poa pratensi L.)具有绿期长、质地优良、色泽青翠、抗寒性强、稠密度大等特点,在全球应用非常广泛。作为冷季型草坪草种之一,草地早熟禾在南京等地的过渡带栽培
江南水乡地处长三角城市群腹地,经济发达。在区域快速城市化过程中,中心城市外围土地的非农化趋势加剧,居住、商业、休闲等项目建设大量占用原有乡村空间和农业用地,使水乡固有的
核苷磷酸化酶(Nucleoside Phosphorylase,NP)广泛存在于动植物器官和微生物中,在细胞核酸代谢尤其是核苷补救途径中起着十分重要的作用,是核苷酸补救合成途径的关键酶。嘌呤核苷
菲油果(Feijoa sellowiana Berg.)是近年从国外引进的一种集食用、观赏、绿化三位于一体的新果树种类。为探索其对引种地环境因子的生态适应性,运用美国LI-COR公司生产的LI-6