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【目的】
研究lncRNA-LET过表达后对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响,以及探讨其中可能存在的分子调节机制。
【方法】
本实验设置Blank组(空白组)、GV146-NC组(阴性对照组)和GV146-LET组(实验组),使用转染试剂LipofectamineTM3000将质粒转染至HeLa细胞。通过Real-timePCR技术检测转染后lncRNA-LET的相对表达量;WesternBlot检测p-ERK1/2和p-p38蛋白表达量变化情况;MTT和平板克隆实验检测细胞增殖能力;划痕实验和Transwell小室迁移实验检测细胞迁移能力;Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力;Hoechst33258染色实验和流式细胞术检测细胞凋亡情况。
【结果】
1.Real-timePCR结果显示:与GV146-NC组相比,GV146-LET组相对表达量明显升高(P<0.01)。
2.WesternBlot结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组p-p38蛋白的表达无明显差异(P>0.05),而GV146-LET组p-ERK1/2蛋白的表达明显降低(P<0.01)。
3.MTT和平板克隆试验结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组抑制HeLa细胞增殖能力(P<0.01)。
4.划痕实验和Transwell小室迁移实验结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组抑制HeLa细胞迁移能力(P<0.01)。
5.Transwell小室侵袭实验结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组抑制HeLa细胞侵袭能力(P<0.01)。
6.Hoechst33258染色实验和流式细胞术结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组对HeLa细胞凋亡无影响(P>0.05)。
【结论】
本研究证实了过表达lncRNA-LET可抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭能力,但对HeLa细胞的凋亡无影响。本研究结果显示,在宫颈癌中lncRNA-LET过表达抑制HeLa细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与ERK1/2通路有关,特别是与其抑制p-ERK1/2蛋白的表达有关。提示lncRNA-LET可作为宫颈癌诊断、治疗及预后评估的新靶点。
研究lncRNA-LET过表达后对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响,以及探讨其中可能存在的分子调节机制。
【方法】
本实验设置Blank组(空白组)、GV146-NC组(阴性对照组)和GV146-LET组(实验组),使用转染试剂LipofectamineTM3000将质粒转染至HeLa细胞。通过Real-timePCR技术检测转染后lncRNA-LET的相对表达量;WesternBlot检测p-ERK1/2和p-p38蛋白表达量变化情况;MTT和平板克隆实验检测细胞增殖能力;划痕实验和Transwell小室迁移实验检测细胞迁移能力;Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力;Hoechst33258染色实验和流式细胞术检测细胞凋亡情况。
【结果】
1.Real-timePCR结果显示:与GV146-NC组相比,GV146-LET组相对表达量明显升高(P<0.01)。
2.WesternBlot结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组p-p38蛋白的表达无明显差异(P>0.05),而GV146-LET组p-ERK1/2蛋白的表达明显降低(P<0.01)。
3.MTT和平板克隆试验结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组抑制HeLa细胞增殖能力(P<0.01)。
4.划痕实验和Transwell小室迁移实验结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组抑制HeLa细胞迁移能力(P<0.01)。
5.Transwell小室侵袭实验结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组抑制HeLa细胞侵袭能力(P<0.01)。
6.Hoechst33258染色实验和流式细胞术结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组对HeLa细胞凋亡无影响(P>0.05)。
【结论】
本研究证实了过表达lncRNA-LET可抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭能力,但对HeLa细胞的凋亡无影响。本研究结果显示,在宫颈癌中lncRNA-LET过表达抑制HeLa细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与ERK1/2通路有关,特别是与其抑制p-ERK1/2蛋白的表达有关。提示lncRNA-LET可作为宫颈癌诊断、治疗及预后评估的新靶点。