【摘 要】
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目的:探讨HBVX基因及其产物对肝细胞凋亡相关基因表达的影响.方法:将实验用SPF级成年雄性KM小鼠分为实验组、空质粒对照组、生理盐水对照组,实验组以构建好的PCDNA3.1-HBVX质
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目的:探讨HBVX基因及其产物对肝细胞凋亡相关基因表达的影响.方法:将实验用SPF级成年雄性KM小鼠分为实验组、空质粒对照组、生理盐水对照组,实验组以构建好的PCDNA3.1-HBVX质粒,空质粒对照组以PCDNA3.1质粒,生理盐水对照组以生理盐水,通过尾静脉高压注入动物体内,在第48h处死取动物肝组织,以RT-PCR,凝胶回收测序及Westernblot检测HBVX表达,以RT-PCR半定量检测动物肝组织内Bax,bcl-2及c-myc的表达情况。结果:实验组小鼠RT-PCR显示465bp处有清楚条带,肝组织内有HBVX mRNA的存在,对照组无HBVX mRNA存在,Westernblot检测有HBVX蛋白的表达;对照组小鼠则无HBVX蛋白表达。通过对小鼠肝组织凋亡相关因子的半定量RT-PCR,相对于空质粒对照组和生理盐水对照组,转染HBVX基因的小鼠肝组织Bax(1.3127±0.0900vs1.0023±0.1670 P<0.05, 1.3127±0.0900vs0.9094±0.1081 P<0.05)、c-myc(1.6294±0.0672vs1.2869±0.0880 P<0.05,1.6294±0.0672vs0.9757±0.0397 P<0.05)、Bcl-2(1.5567±0.1257vs0.6856±0.1554 P<0.05,1.5567±0.1257vs0.5488±0.1278 P<0.05)的mRNA相对表达量明显增高,差异有显著性意义。结论:成功建立表达HBVX的小鼠动物模型,并发现转染HBVX基因后小鼠肝脏组织内Bax、c-myc、Bcl-2的mRNA表达同时上调,证明在肝组织中,HBVX参与了对Bax,Bcl-2和c-myc转录水平的调节,并且其作用存在双向性。
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