【摘 要】
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目的:神经干细胞的发现使中枢神经系统修复成为可能。目前,神经科学领域研究热点之一就是诱导神经干细胞定向分化,这也是神经干细胞进行临床应用所要解决的问题之一。本实验
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目的:神经干细胞的发现使中枢神经系统修复成为可能。目前,神经科学领域研究热点之一就是诱导神经干细胞定向分化,这也是神经干细胞进行临床应用所要解决的问题之一。本实验旨在探讨胰岛素样生长因子(IGF-1)对体外培养的胚胎小鼠神经干细胞增殖和分化的影响。方法:将孕14天小鼠引颈处死,分离取出胚鼠大脑皮层,制成单细胞悬液,采用无血清培养法,在表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维生长因子(bFGF)作用下培养,观察不同阶段的神经干细胞生长情况。连续传代,传至第三代后,加入不同浓度的IGF-1,观察神经干细胞的生长和分化情况。用MTT法检测干细胞增殖情况,用免疫荧光技术对神经干细胞的分化情况进行鉴定,并进行统计学分析。结果:从胚胎小鼠大脑皮层中分离培养的神经干细胞能快速增殖形成悬浮生长的细胞团。经免疫荧光技术鉴定,细胞团Nestin抗体标记阳性,诱导分化后的细胞NSE和GFAP标记阳性。在对神经干细胞培养过程中,我们发现随着IGF-1浓度的增加,干细胞增殖速度亦随之加快,且有剂量依赖性。去除EGF和bFGF,加入不同浓度IGF-1,并诱导神经干细胞分化。用免疫荧光技术对神经干细胞的分化情况进行检测,计算NSE阳性细胞率。实验表明随着IGF-1浓度逐渐增高, NSE阳性细胞率也逐渐增高,且IGF-1组NSE阳性细胞率与对照组有统计学显著性差异(P<0.05)。结论:
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