【摘 要】
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阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)又称为老年痴呆症,是一种进行性发展的神经退行性疾病。Appoptosin是AD致病过程中的关键新蛋白,APP-Appoptosin通路多靶点活性评估体
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阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)又称为老年痴呆症,是一种进行性发展的神经退行性疾病。Appoptosin是AD致病过程中的关键新蛋白,APP-Appoptosin通路多靶点活性评估体系是筛选抗老年痴呆活性成分的有效手段。芪类化合物是一类具有良好的抗老年痴呆活性的天然产物,前期研究发现宫部苔草酚C等芪类化合物能够通过抑制β-分泌酶的活性,降低与老年痴呆密切相关的Aβ蛋白的产生。本课题在前期研究的基础上,选择了宫部苔草酚C含量丰富的砂钻苔草作为研究对象,对其中的芪类化合物进行化学成分研究,以期发现更多结构多样的芪类化合物,通过APP-Appoptosin通路多靶点活性评估体系筛选抗老年痴呆活性成分。本文综合运用了硅胶柱色谱、ODS柱色谱、SephadexLH-20凝胶柱色谱、分析型HPLC、半制备型HPLC以及重结晶等方法,从砂钻苔草60%乙醇提取物大孔树脂60%洗脱部分中分离得到了 21个单体化合物。利用核磁共振波谱、质谱、紫外吸收光谱和化合物的理化性质对其中18个化合物进行了结构鉴定,其中芪类化合物8个,黄酮类化合物8个,其他类化合物2个。化合物18为新化合物,化合物5、6、7、12、14、16、17、19、20、21为苔草属植物中首次分离,化合物2、8、13、15为砂钻苔草中首次分离。用过氧化氢损伤N2a695细胞(稳转APP695的小鼠神经瘤细胞系)及人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)建立体外神经细胞损伤模型,利用MTT法检测样品对N2a695以及SH-SY5Y细胞增殖的影响,结果显示针对两种不同的细胞系,化合物1、3、7、8及化合物2、13、16、21具有一定的神经保护作用;western blot实验结果显示化合物3、12、15作用于SH-SY5Y细胞,可使appoptosin蛋白表达下调;同时使用MTT法检测分离的化合物对8种肿瘤细胞系的细胞毒活性,其中一些化合物具有明显的细胞毒活性,IC50值范围为3.25-44.82μM。
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