无眼菠萝的组织培养快速繁殖研究

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无眼菠萝是近年来培育出来的一个新型菠萝品种,到目前为止,国内外尚未发现该品种组培快速繁殖的报道。本文从工厂化生产角度出发,力求探索通过组织培养方式快速繁殖无眼菠萝种苗。以解决目前无眼菠萝苗市场供不应求的局面。着重研究了无眼菠萝茎、根、叶外植体建立芽诱导、愈伤组织诱导及再分化成苗、继代增殖培养和生根培养等五个环节。结果表明:1、外植体以茎段(具有腋芽)或顶芽为好,春季(3-4月)、秋季(9-10月)均为适宜取材时间和培养时间。2、外植体消毒灭菌时,先用自来水冲洗1-2小时,再用75%酒精消毒3-5秒钟后用0.1%HgCl2消毒灭菌10分钟,无菌水冲洗4-5次,效果较好。3、外植体培养过程中,培养基加入0.1%活性碳粉、黑暗培养5-7天或连续更换培养基等办法可以明显减少褐变,提高外植体成活率。4、茎顶端横截成3~4cm大小,接入MS+BA2.0+NAA0.05培养15天,待腋芽原基萌动后再切成小块接入诱导出芽培养基,出芽率极大提高。5、0.5-1cm3大小的茎段切块在MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L+3%蔗糖培养基中诱导出芽效果较好。6、茎、根、叶三种器官均可以诱导成愈伤组织,比较理想的培养基为MS+NAA2.0mg/l+KT0.5mg/l+3%蔗糖。但根、叶诱导获得的愈伤组织,难以诱导成苗,而茎段诱导获得愈伤组织,则比较容易诱导成苗。7、在增殖培养中,若逐渐降低外源激素的浓度,可使苗变得更健壮。8、利用1/2MS+NAA0.1mg/l+IBA0.1mg/l+2%蔗糖+0.1%活性碳粉,生根效果很好。9、移栽基质以泥炭:椰糠:珍珠岩:黄泥=4:1:1:2为佳。10、试验结果表明,培养20-30天后增殖系数为5左右,理论上一年12个月每个芽可获3×108株苗,可满足市场需要解决无眼菠萝短缺的状况。11、组培苗定植大田一年半后就可以催花长果。
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