论文部分内容阅读
绵马贯众为鳞毛蕨科植物粗茎鳞毛蕨(Dryopteris crassirhizoma Nakai)的干燥根茎及叶柄残基,秋季采挖,削去叶柄,须根,除去泥沙,晒干所得。绵马贯众始载于《神农本草经》,味起初淡而微涩,后渐苦、辛,性微寒,有小毒,具有清热解毒、杀菌驱虫、止血等功效。绵马贯众收录于2015年版《中华人民共和国药典》,主产于河北、内蒙古、东北三省等中国北方地区。绵马贯众为临床常用中药材,具有多种药理活性,主要有抗病毒、抗疟、抗肿瘤、抗癌、驱虫、止血、抗细菌等临床应用。目前对绵马贯众的研究主要集中在抗细菌感染、抗疟、抗肿瘤等方向,而对其抑制真菌,尤其是对临床常见皮肤癣菌的抑制作用研究较少。本实验室前期研究发现,间苯三酚类化合物对浅部真菌具有明显的抑制作用,而且鳞毛蕨属植物富含间苯三酚类化合物,因此本文拟对绵马贯众的间苯三酚类化合物进行提取分离,并对间苯三酚类化合物对浅部真菌抑制活性进行研究。主要研究内容:1、采用硅胶柱色谱法、凝胶柱色谱法、重结晶法、ODS柱色谱法和制备液相色谱法对绵马贯众进行分离纯化,得到单体化合物。根据所得单体化合物的理化性质、显色反应、1H-NMR数据和13C-NMR数据等,解析出单体化合物结构式。2、采用M38-A2微量稀释法,对分离得到的3个间苯三酚类化合物,筛选其对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、犬小孢子菌三种真菌的抑菌活性,测定其最小抑菌浓度(MIC)。主要研究结果:1、从绵马贯众中分离得到12个化合物,通过其理化性质、显色反应和波谱数据等鉴定了12个化合物,它们分别为间苯三酚类化合物10个:Albaspidin AA(白绵马素AA)(Y2),Trisflavaspidic acid ABB(三环黄绵马酸ABB)(Y4),Albaspidin AP(白绵马素AP)(Y5),Flavaspidic acid PB(黄绵马酸PB)(Y6),Aspidin AB(绵马素AB)(Y7),Albaspidin PP(Y8),filixic acid ABP(绵马酸ABP)(Y9),Desapidin AB(Y10),Albaspidin PB(Y11),Flavaspidic acid AB(黄绵马酸AB)(Y12);脂肪酸类化合物1个:(10E,12E)-9-oxooctadeca-10,12-dienoic acid(Y1),饱和脂肪醇类化合物1个:Pentacosanol(Y3)。2、分离出的3个单体化合物对须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophytes)的MIC值>160μg/mL;3个单体化合物Trisflavaspidic acid ABB、Albaspidin AA和Flavaspidic acid AB,对红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)的MIC分别为:160μg/mL、60μg/m L、70μg/mL;3个单体化合物Trisflavaspidic acid ABB、Albaspidin AA和Flavaspidic acid AB对犬小孢子菌(Microsporum canis)的MIC分别为:140μg/m L、90μg/m L、80μg/mL。结论:本实验从绵马贯众中分离得到12个化合物,其中包括10个间苯三酚类化合物,1个脂肪酸化合物和1个饱和脂肪醇化合物,其中化合物Y1,Y10,Y11为首次从该植物分离得到;3个间苯三酚类化合物均具有一定的抑制真菌活性,其对红色毛癣菌的抑菌活性顺序为:Albaspidin AA>Flavaspidic acid AB>Trisflavaspidic acid ABB,其对犬小孢子菌的抑菌活性顺序为:Flavaspidic acid AB>Albaspidin AA>Trisflavaspidic acid ABB。