衰老是人们普遍关注和必须面对的生物学现象。社会老龄化以及衰老相关疾病发病率不断上升，己成为当今世界日益突出的社会问题。衰老与癌变有着密切的内在联系。揭示细胞衰老的分子机理，对有效控制衰老、预防和治疗衰老相关疾病，探索肿瘤发生和发展的分子机制具有重要意义。 细胞衰老是指细胞脱离细胞周期并不可逆地丧失增殖能力后进入的一种相对稳定的状态，细胞衰老是个体衰老的基础。近些年尽管已有许多衰老相关蛋白被鉴定，但衰老的信号通路及其调节机制还不是很清楚。新近研究显示：miRNA通过调控基因表达参与发育、分化、细胞死亡及癌变等许多重要生物学过程，miRNA代表一个新层次上的基因表达调控方式。本研究的目的是鉴定衰老细胞相关miRNA、研究其在细胞衰老通路中的调节作用。 在论文的第一部分研究中，以人胚肺成纤维细胞W138为模型，利用miRNAmicroarray鉴定了12个在衰老细胞中表达显著差异的miRNA，(其中包括了6个表达下调和6个表达上调的miRNA)，并用real-timeRT-PCR的方法验证了它们的差异表达。在这些miRNA中，下调的6个miRNA(miR-15b，miR-17-5p，miR-20a，miR-25，miR-93，miR-106a)已被报道与细胞增殖，分化，凋亡及肿瘤发展有关。在衰老细胞中上调的6个miRNA(miR-127，miR-329，miR-409，miR-487b，miR-493，miR-495)均位于人14号染色体q32.31上约200kb位点内。这6个miRNA可能位于距离很近的两个miRNA基因簇(miRNAcluster)上。这是迄今发现的第一个衰老相关的miRNA基因簇，这对于研究衰老过程中miRNA和miRNA基因簇的转录调节，以及衰老通路中miRNA作用机制提供了新的研究模式。 论文的第二部分我们选取了两种miRNA-miR-372和miR-373为研究对象，构建了miRNA逆转录载体真核表达体系，在细胞内成功地表达成熟的miRNA，并用real-timeRT-PCR的方法验证了我们所构建的表达载体的有效性。进一步探讨了miR-372和miR-373在细胞内的过表达对细胞生长速度和细胞寿命的影响，与对照相比，发现miR-373可以在一定程度上加快细胞的增殖速度且延长细胞寿命，而miR-372的过表达对细胞程序性衰老没有影响。由此，我们可以推论miR-373可能参与细胞衰老的调控。