凤仙花坏死斑病毒传毒特性研究

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凤仙花坏死斑病毒(Impaliensnecroticspotvirus,INSV)是一种能够引起多种农业和园艺观赏作物严重病害的植物病毒,该病毒主要依靠蓟马传播,其中西花蓟马是最重要的传播介体。本研究将采自昆明非洲菊大棚的西花蓟马,经生物学鉴定和饲养,将饲养4-5代的一龄若虫接种到采自呈贡蝴蝶兰上的INSV阳性样本获毒,并将获毒的一龄若虫培养成成虫,转接到健康的黄花烟上传毒,来模拟自然界西花蓟马的传毒过程。利用RT-PCR技术,DAS-ELISA技术对西花蓟马的获毒率、传毒率以及获毒时间阈值进行了测定,并结合优化的已构建的检测INSVTaqMan实时荧光定量PCR对西花蓟马体内INSV的增殖规律进行测定;并利用聚集度指标、Iwao和Taylor回归方程对西花蓟马在花卉和蔬菜上的空间分布图式和种群动态进行调查。结果显示:西花蓟马一龄若虫获毒24h的平均获毒率为93.3%,成虫平均传毒率为80%,最小获毒时间为30min,传毒率随获毒时间的增加而增加,且核壳体蛋白(nucleocapsidprotein,NP)的量也有所增加,当获毒48h,传毒率达到100%;通过TaqMan实时PCR检测显示一龄若虫每5头体内的INSV病毒在100拷贝/μl,随着蓟马的发育,INSV在西花蓟马体内呈指数级扩增,到成虫浓度达最大,当成虫体内浓度增加到102拷贝/μl开始传播病毒,但成虫体内的INSV病毒不传给子代;西花蓟马已经成为昆明部分花卉和蔬菜作物上的蓟马优势种群,且空间分布型为聚集分布。通过对西花蓟马传播INSV特性的研究,掌握了西花蓟马对INSV的传毒和蓟马的整个发生动态,从而为进一步探究INSV流行规律和INSV病毒病害的预测与预报提供理论依据,为研究蓟马和番茄斑萎病毒属病毒之间的相互关系提供理论基础。
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