目的：　　从不同时间点针刺对成纤维细胞骨架蛋白的影响入手研究穴区成纤维细胞骨架的时相特征探索经穴反应时间特征的基础。　　方法：　　选用SD雄性大鼠（清洁级）置于动物节律隔离单元，驯化7天后，将108例疼痛阈值在3-10s的大鼠随机分为模型组和空白组，其中造模组72只，空白组36只。造模方法为在造模组大鼠右侧足垫部皮内注射完全弗氏佐剂0.1ml，空白组注射等量生理盐水。待模型制备成功后，再将造模组大鼠随机分为模型组和针刺组，每组各36只。然后根据处理时间的不同再分别分为ZT0、ZT4、ZT8、ZT12、ZT16、ZT20，6个亚组，每组6只。在造模成功的第2天，各时间点针刺组的大鼠分别在相应时间点接受针刺治疗，采用0.5寸的毫针针刺大鼠患侧肢体的足三里穴，运用捻转行针手法，每5min行针一次，持续1min，留针30min。空白组和模型组不进行针刺，在相应时间内固定捆绑即可。连续治疗7天后，取大鼠右侧足三里处皮肤及皮下组织，采用荧光免疫双色标记法进行染色，然后通过LSCM来观测针刺对大鼠穴区皮肤及皮下组织中成纤维细胞骨架重构的影响。　　结果：　　1、免疫荧光双染法标记各个指标，其切片在LSCM镜下可以看到细胞排列在空白组和模型组均没有针刺组的密集，且针刺组的细胞横截面面积增大，骨架呈圆梭形排列，染色均匀且较浓郁，集中在细胞核四周，并相互交织形成网状结构，尤其在ZT8和ZT12最明显，在ZT16最不显现。　　2、针刺组穴位局部细胞骨架蛋白F-actin和β-tubulin的表达明显高于空白组和模型组，尤其在ZT12、ZT20两个时间点差异最明显，P＜0.01。针刺组穴区成纤维细胞骨架蛋白F-actin和β-tubulin的表达也明显高于空白组和模型组，尤其在ZT12差异最显著。　　3、同组不同时间点的比较，时间因素在不同组的大鼠穴区皮肤成纤维细胞F-actin的比较中差异不明显，P＝0.093，P＞0.05，差异不具有统计学意义。而时间因素在不同组的大鼠穴区皮肤成纤维细胞β-tubulin的比较中差异显著，P＝0.02，P＜0.05。针刺作用对F-actin和β-tubulin平均光密度影响最为显著的点在ZT12，针刺对F-actin平均光密度影响最小的时间点在ZT4点，对β-tubulin平均光密度影响最小的时间点在ZT8。　　4、成纤维细胞中F-actin的表达量会受到β-tubulin表达量的显著影响，P＝0.00。　　结论：　　1、不同时间点针刺对成纤维细胞骨架重构的作用不同。细胞骨架形态改变最显著的时间点在ZT8和ZT12，最差在ZT16。　　2、不同时间点针刺对成纤维细胞骨架蛋白表达量的影响不同，其中表达量最高的点在ZT12， F-actin表达量最低点为ZT4，β-tubulin的最低点在ZT8。