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目前,由于受环境等多方面的影响,人们对药物的需求也越来越多。对药物的研究也越来越多的受到人们的关注。药物在人体发挥作用离不开相应蛋白质的配合,因此研究蛋白质与药物的结合机理至关重要。本文就牛转铁蛋白与头孢类药物的相互作用结合了多种方法进行了研究。实验探究包含下列各部分:第一章:参考34篇文献就蛋白质大分子-药物小分子结合机制的不同研究方法进行了综述,介绍了多种光谱法,包括荧光猝灭法、紫外吸收光谱法、圆二色光谱法等。简单总结了蛋白质对于生物体的多种功能。第二章:将牛转铁蛋白(TRF)作为研究对象,298 K、310 K和318 K三个温度下对牛转铁蛋白与头孢呋辛钠(CSI)的相互作用进行了实验。由实验数据知:TRF、CSI的作用位点近似为1,提高温度Ka变小,表示TRF、CSI反应生成的产物的稳定性降低,该荧光猝灭过程是静态的。ΔS>0、ΔG<0,表示该过程属于自由能降低且熵增的自发过程。第三章:将转铁蛋白的荧光变化作为研究对象,在298 K、310 K、318 K下采用紫外吸收、传统荧光、同步荧光、圆二色谱法,对TRF与头孢噻肟钠(CEM)的结合综合分析。数据处理和分析显示:TRF的荧光伴随CEM浓度的提高而呈现规律性猝灭,猝灭方式是静态的,两者借助静电作用结合,反应生成新物质。结果的准确性通过上述方法进行了验证。此外,同步荧光和圆二色谱也表明CEM影响了TRF的构象。第四章:分别以TRF、牛血清白蛋白(BSA)为研究对象,就TRF、BSA与CSI之间的结合机理运用多种方法实施了研究。结果表明:伴随CSI的加入,BSA、TRF的吸光度峰值减小,最高吸光度所对应的峰位置有3 nm、5 nm的红移,表示CSI与BSA、TRF间有新物质生成,CSI对BSA、TRF吸收光谱的猝灭是静态的。TRF、BSA与CSI的结合作用影响了TRF的α-螺旋结构,导致其变得松散且使得TRF的荧光猝灭。尽管CD峰的峰值有所变化,但其峰形与位置都没受到影响,从而证明在TRF、BSA中主要结构依然是α-螺旋。第五章:以TRF为研究对象,对TRF-头孢西丁钠(CFS)体系的作用机理进行了研究。结果显示:提高温度Ka变小,表示TRF、CFS反应生成的产物的稳定性降低,该荧光猝灭过程是静态的,ΔH<0,ΔS>0,表示TRF、CFS凭借静电作用力而结合。λex=280 nm时对应的猝灭水平大于λex=295 nm时的荧光猝灭水平,进而可知CFS与BSA、TRF相互结合过程中同时有Trp、Tyr两者的参与。多种方法应用于同一研究可以使所得结果更精确,因此在此研究的基础上仍可拓展和探索新的方法。