金银花多糖的分离纯化与生物活性研究

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金银花为忍冬科植物忍冬(Loniccra japonica Thunb)、红腺忍冬(Lhypoglauca Miq)、山银花(L confusa DC)或毛花柱忍冬(L dasystyla Rchd)的干燥花蕾,其味甘,性寒,归肺,心,胃经。清热解毒,疏散风热,具有抗病原微生物,抗毒,抗炎,解热等作用。目前对于金银花活性成分的研究仅限于小分子物质,而对于极具开发前景的活性多糖的研究报道较少。为了进一步开发利用金银花资源,本课题选取金银花为材料,采用现代分析技术对金银花多糖进行了分离、纯化,并对纯化组分进行了组成及结构测定,采用现代功能评价方法对金银花多糖粗提物的体外抗氧化活性和对小鼠体内抗氧化活性进行了初步研究,试验主要结论如下:1.采用水溶醇沉法提取金银花多糖的最佳提取条件组合为A1B2C1D2,即40℃,2h,20倍水,提取2次。2.超滤结果表明:半数以上的金银花多糖的分子量在100KD以上,100-50KD,50-30KD和30-10KD的范围内都有金银花多糖的分布。3.经DEAE-52离子交换纤维素柱色谱和SephadexG-100凝胶柱色谱分离出FL-C1,FL-D1,FL-D2三种组分,其纯度鉴定分别采用Sephadex G-200凝胶柱色谱和高效凝胶渗透色谱法测定后,表明FL-C1,FL-D1两种组分均为单一组分。计算得FL-C1,FL-D1的分子量分别为120000Da,30000 Da。4.单糖组成分析结果表明,FL-C1由葡萄糖(Glu)、半乳糖(Ga1)、核糖(Rib)、阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xy1)、果糖(Fru)组成。FL-D1由葡萄糖(Glu)、半乳糖(Gal)、木糖(Xyl)、阿拉伯糖(Ara)、鼠李糖(Rha)组成。FL-D2由葡萄糖(Glu)、半乳糖(Gal)、甘露糖(Man)、核糖(Rib)、阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xyl)、果糖(Fru)组成。5.体外抗氧化活性表明,金银花粗多糖的总还原力随着浓度的增加逐步升高,并与多糖浓度有很好的相关性。金银花多糖对PMS-NADH-NBT系统产生的超氧自由基有显著的抑制作用。6.小鼠体内抗氧化活性表明,金银花多糖提取物可以显著提高受试小鼠血清、肝组织、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性,而显著降低这些组织中丙二醛(MDA)的含量。结果说明金银花多糖提取物具有抗氧化性。
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