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心脏是脊椎动物器官发生过程中最早形成的结构之一.心脏发育是一个复杂的过程,它受一系列基因的精确调控.鉴定在心脏发育过程中起调控作用的基因和分子途径,将促进人们从分子水平认识心脏发育和先天性心脏病发生的机制.锌指基因家族是最大的人类基因家族之一,其蛋白产物主要通过与DNA结合而起控制转录的作用.MAPK信号传导途径是广泛存在于脊椎动物细胞调控的一种机制,许多转录因子是重要的MAPK靶分子.为了鉴定控制心脏发育和疾病发生的新基因,该研究从心脏cDNA文库中克隆了两个人类新基因,ZNF411和ZNF415,它们都位于19号染色体上,属于Cys2/His2型锌指蛋白家族.Northern杂交结果表明ZNF411在心脏和骨骼肌表达而ZNF415只在心脏中强烈表达,表明这两个基因可能对心脏发育调控起着重要作用.通过构建增强型绿色荧光蛋白与ZNF411和ZNF415融合基因的真核表达载体,转染COS-7细胞系,瞬时表达后荧光显微镜观察了它们编码蛋白的活细胞定位及表达,证明这两个基因均定位于细胞核,是一种核转录调控蛋白因子.利用Fmoc固相多肽化学合成法合成了ZNF415基因的20个氨基酸的多肽,用兔血清免疫的方法得到了ZNF415基因的多克隆抗体,这为从免疫组织化学方面研究它的功能提供了便利.报道基因分析证明ZNF411是一个转录抑制因子,当ZNF411蛋白在COS-7细胞中过量表达时抑制Ap-1和SRE的活性,这表明ZNF411可能是MAPK信号途径中的负调控因子.综合这些结果,我们可以初步得出结论,ZNF411和ZNF415是心脏发育过程的调控因子,可能是心脏疾病发生的候选基因.