农吉利(Crotalaria sessiliflora L.)为豆科猪屎豆属植物野百合的干燥全草,功能为清热、利湿、解毒。在我国广泛用于多种疾病的治疗,主治痢疾、疮疖、耳鸣耳聋、头晕目眩及各种癌症如皮肤鳞状上皮癌、食管癌、宫颈癌等。目前的研究表明农吉利中含有生物碱、黄酮类化合物等有效化学成分。本文采用了微波强化提取农吉利中有效化学成分生物碱和黄酮化合物,系统地研究了在微波作用下各种因素对提取的影响,探讨了农吉利中生物碱和黄酮化合物提取的工艺方法和优化条件,利用色谱、光谱及色谱质谱联用技术建立了生物碱和黄酮化合物的分析方法和指纹图谱方法,为更深入地研究和开发农吉利有效化学成分打下基础,尚未见相关的系统研究报道。本文进行了下述研究工作:1、采用溶剂回流提取法(SRE)、微波辐射-溶剂回流提取(MISRE)、聚焦微波辅助提取法(FMAE)提取农吉利中的有效化学成分生物碱和黄酮类化合物。结果表明,与常规的SRE相比,采用诸如MISRE和FMAE微波辅助方式提取,生物碱和黄酮类化合物的提取率明显提高,其中FMAE提取效果最佳,表明农吉利药材在微波的作用下,能强化生物碱和黄酮类化合物的提取过程。2、利用酸性染料溴麝香草酚蓝显色和牡荆素对照品表征,采用分光光度法分别建立了测定农吉利提取液中总生物碱和总黄酮的分析方法;采用高效液相色谱法,还建立了农吉利中的主要有效成分农吉利甲素、牡荆素和异牡荆素的含量的HPLC分析方法。将方法分别应用于不同产地农吉利中的总生物碱、总黄酮以及农吉利甲素、牡荆素和异牡荆素等主要有效成分的分析,结果较为满意。3、采用LC-ESI-MS/MS分析了农吉利提取液中的黄酮和生物碱化合物,通过一级、二级质谱分析和对照品验证,已确定提取液中含有荭草素、异荭草素、牡荆素和异牡荆素四种黄酮化合物和一种生物碱即农吉利甲素,并推断出另外三种化合物的分子结构,初步了解了农吉利提取液中的主要有效化学成分。4、采用指纹图谱方法建立了农吉利黄酮和生物碱的高效液相色谱指纹图谱的方法。通过分析液相色谱的指纹图谱,确立9个峰为黄酮指纹图谱的共有峰,4个峰为生物碱的共有峰。利用中药色谱指纹图谱相似度评价方法及软件进行了数据处理和评价,农吉利10批样品的相似度均在0.9以上,表明农吉利10个批次间指纹特征明显,相似度良好,适合于药材的鉴别。