农药三唑磷对刺参的毒性的研究

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本论文研究的目的是为了评价三唑磷对刺参的毒性效应,从而为生产实践提供理论指导。共分三个阶段进行:第一阶段对刺参的进行毒性实验,确定刺参对三唑磷的耐受性,即48h、96h半数致死浓度和安全浓度,对于控制药物用量具有重要意义;第二阶段通过生物化学手段,观察在两种组织中,用药个体与健康个体的4种同工酶:乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、乙醇脱氢酶(ADH)、酯酶脱氢酶(EST)有何异同;第三阶段,使用组织切片技术,观察组织的超微结构,比较三唑磷对这些组织器官的影响,破坏程度如何,与正常组织有何差异。研究结果总结如下:本研究探讨农药三唑磷对刺参的急性毒性效应,以12cm左右的刺参为试验动物,采用静水停食实验法,在水温(20.0±1.3)℃条件下,开展农药三唑磷对刺参的急性毒性试验,试验时间96h。结果表明,三唑磷对刺参呈现以蓄积为主导的急性毒发效应,其对刺参的48h的半致死浓度为45.999mg.L-1,96 h的半致死质量浓度为36.879 mg/L,安全浓度(SC)为3.6879mg.L-1。所构建的刺参累计死亡概率与质量浓度和实验时间间数学模型可作为侦查和分析农药排放时间和致刺参大量死亡时间的重要计算工具,从而为生产实践提供理论指导。本试验通过生物化学手段用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法探讨农药三唑磷对刺参同工酶表达的影响,依据三唑磷的96小时半数致死剂量设置了10mg/L、15mg/L、20mg/L、25mg/L四个稀释浓度组,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法研究了三唑磷对刺参乳酸脱氢酶(LDH)、乙醇脱氢酶(ADH)、酯酶(EST)和苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶表达的影响。结果表明,经过多次反复试验并未检测出刺参体内的乳酸脱氢酶和乙醇脱氢酶,可能与个体差异有关;与对照组相比三唑磷对刺参酯酶(EST)和苹果酸脱氢酶(MDH)的活性均有显著影响,不同浓度对EST和MDH的影响不同,在低浓度时两种酶活性都增强,表现为应激性,高浓度时活性降低或消失,酶活性与染毒浓度存在剂量-效应关系,说明三唑磷对刺参MDH、EST同工酶有一定毒性。本试验通过组织学和病理学手段,根据急性毒性试验确定的三唑磷对刺参的安全浓度(3.6879mg.L-1),然后采用透射电镜技术研究了该浓度下三唑磷蓄积对刺参两种组织(肌肉和肠道)超微结构的影响。结果表明:三唑磷对肌肉损伤的主要靶部位是线粒体和肌原纤维,表现为线粒体内空泡化,线粒体溶解,肌原纤维断裂,明暗带不清楚;肠黏膜上皮细胞脱落,肠黏膜内有少量炎性细胞浸润,肠绒毛内毛细血管扩张、充血。研究结果证实,农药三唑磷可对刺参体内组织造成损伤,并且三唑磷的浓度越高,损伤程度越严重。
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