【摘 要】
：
目的:本研究拟研究银屑病外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）DNA甲基化表达谱的特征,分析银屑中医不同证型之间DNA甲基化表达谱的差异,为中医证候多样性提供给物质基础,进一步为中医银屑病的精准辩证提供科学依据。方法:收集35例受试者血液样本,包括银屑病血热证15例,血瘀证14例和正常对照6例,提取PBMC,通过DNA质检合格后,采用Ill
【基金项目】
：
上海市中医院管理局“2018年-2020年三年行动计划”（项目编号:ZY（2018-2020）-CCCX-2004-08）；
论文部分内容阅读
目的:本研究拟研究银屑病外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）DNA甲基化表达谱的特征,分析银屑中医不同证型之间DNA甲基化表达谱的差异,为中医证候多样性提供给物质基础,进一步为中医银屑病的精准辩证提供科学依据。方法:收集35例受试者血液样本,包括银屑病血热证15例,血瘀证14例和正常对照6例,提取PBMC,通过DNA质检合格后,采用Illumina Human甲基化850k芯片对各组样本进行测序分析。筛选出差异甲基化位点,分析相关差异基因在染色质上的分布,按基因注释分类和Cp G岛注释分类筛选样本组间的差异甲基化区域,采用GO和KEGG对差异基因进行功能分析。最后通过spearman相关性分析筛选与银屑病疾病严重程度密切相关的差异基因,并通过RT-PCR和WB进行验证。结果:1.银屑病与正常对照者相比,共筛选出3023个差异甲基化位点,总体呈低甲基化趋势（77%）。在银屑病中差异基因位点在染色体上主要分布于chr X链,在基因组的分布主要位于转录起始位点,在Cp G区域主要分布于Cp G岛,并在以上区域均以低甲基化为主。银屑病血热证、血瘀证对比正常受试者关于上述的总体趋势基本一致。但在差异位点基因的功能性分析中却显示出了不同的类别,银屑病血热证主要涉及病毒、细菌感染、I型糖尿病、m TOR信号通路、胰岛素抵抗、炎性肠病（IBD）、昼夜节律以及AMPK信号通路,而银屑病血瘀证主要与NF-κB信号通路、泛素介导的蛋白水解、神经营养蛋白信号通路、Erb B信号通路、氨基酸的生物合成以及细菌侵袭上皮细胞相关。2.银屑病血瘀证与血热证相比,共筛选出232个差异甲基化位点,血热证与血瘀证相比呈现出更低的甲基化水平。差异基因位点在基因组中主要分布在基因体区域,在Cp G区域主要位于shelf区域。差异位点基因的GO功能分析显示,在生物学功能中主要与伤口愈合、GTPase活性、止血、趋化性和凝血有关。KEGG pathway结果显示相关位点的基因与甲状腺激素信号通路、RNA降解、肌动蛋白细胞骨架的调节、血小板活化、补体和凝血级联等通路关系密切。3.通过Spearman相关性分析共筛选出49个与银屑病PASI评分相关的Cp Gs位点,其中NUP93和ZNF835基因在银屑病血热证中与血瘀证相比呈现出更高的甲基化水平,RT-q PCR结果显示,NUP93和ZNF835的m RNA表达有升高的趋势（P＞0.05）,在蛋白水呈显著高表达（P＜0.05）。结论:银屑病PBMC中DNA甲基化水平呈低甲基化趋势,并与多种炎症信号路通、代谢以及免疫类疾病相关。银屑病血热证与血瘀证之间展现出了不同的甲基化位点,总体而言,血热证的DNA甲基化水平与血瘀证相比更低,生物信息功能分析显示出两种证型之间的差异位点基因存在着不同的功能,揭示了银屑病中医不同证型之间的潜在作用机制。
其他文献
目的:观察黄芪多糖（APS）对黑色素瘤干细胞（MSCs）自我更新的作用,进一步研究其可能的作用机制。方法:在体外实验中我们选用无血清富集培养及免疫磁珠分选的方式从A375和B16-F10中筛选出MSCs,采用q RT-PCR及Western Blot检测MSCs标志物ALDH1A3、CD133及干细胞核转录因子SOX2、OCT4、Nanog m RNA及蛋白的表达水平,验证MSCs体外培养体系的建
【摘要】目的:评价扶正化瘀方对慢乙肝肝纤维化气虚血瘀证患者的治疗作用及其活性成分F02促进活化态肝星状细胞凋亡抗肝纤维化的效应机制。方法:（1）收集慢乙肝肝纤维化气虚血瘀证患者86例,分别采用FZHY片+抗病毒治疗/仅用抗病毒治疗6个月,填写中医证候积分量表,检测肝肾功能、血液常规、血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ、GLU含量,观测肝组织病理变化、肝组织中α-SMA表达及活化态肝星状细胞凋亡情况。（2
标准体系建设是茯苓全产业链标准化工作的顶层设计，对于提升和规范行业管理水平，增强核心竞争力具有十分重要的作用。本文结合茯苓相关标准制修订和标准体系研究现状，系统梳理标准体系构建思路和过程，对茯苓全产业链进行系统分析和研究，确定标准分类原则，设计并构建科学合理、结构完整的茯苓全产业链标准体系框架，提出推进茯苓全产业链规范化和标准化管理的对策建议，为实现茯苓全产业链高质量发展提供借鉴和参考。
目的:课题组前期工作发现转凝蛋白（Transgelin-2）是针刺抗哮喘效应蛋白MT-2的结合蛋白,并通过激光共聚焦荧光显微镜发现二者在气道平滑肌细胞膜表面存在结合。然而,目前没有其它证据表明Transgelin-2是膜蛋白,其跨膜方式、跨膜区域尚不清楚。因此本论文通过生物信息学方法对Transgelin-2蛋白跨膜区域、信号肽等进行预测分析。并构建Transgelin-2两个亚型的融合表达载体,
目的:研究艾灸对溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis,UC）大鼠肠黏膜屏障保护作用,并结合长链非编码RNA-信使RNA（lnc RNA-m RNA）网络探讨艾灸对UC肠黏膜屏障保护的免疫调节机制,以期为艾灸治疗UC的临床应用提供实验资料和科学依据。方法:第一部分不同灸法对正常和UC大鼠肠黏膜屏障的保护作用将体重180±20g的雄性清洁级SD大鼠随机分为正常组,正常+隔药灸组,正常+温
目的:观察小柴胡汤对肿瘤患者所伴随抑郁状态的改善作用及其对肠道菌群的调节作用,并通过相关实验探究小柴胡汤对慢性束缚应激所致大肠癌伴抑郁小鼠肠道菌群及炎性因子的影响来揭示其改善抑郁样行为的作用及机制。方法:第一部分选取符合研究标准的患者72例,随机分为2组,治疗组36例予小柴胡汤颗粒剂,对照组36例予小柴胡汤颗粒安慰剂,共治疗6周,评估2组患者治疗前后SDS和SAS量表评分、细胞免疫和细胞因子水平及
目的:（1）回顾性研究类风湿关节炎住院患者不同类型贫血的分布情况,探讨炎症性贫血（AI）与炎症的相关性。（2）观察生血合剂对类风湿关节炎继发炎症性贫血的临床疗效和安全性,分析炎症标志物与铁代谢指标的关系,探讨生血合剂治疗炎症性贫血的作用机制。方法:（1）对2014年2月-2019年7月上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院风湿科住院电子病历进行检索,回顾性研究2614份出院诊断为类风湿关节炎（RA）
矿山开采是重要的经济来源之一，而开采过程中往往会出现各种违法开采和地质灾害等现象，因此对矿山开采的监测具有重要意义。随着遥感技术的发展，越来越普遍地应用在矿山监测上。本研究利用遥感技术，实地调查建立矿山开采遥感解译标志，解译矿山开采范围，叠合矿权矢量判断滁州市53个矿山的开采状况，并形成清单。通过对矿山进行遥感动态监测，可以对矿山的开采状态一目了然，能很好地为当地政府提供监管依据和技术支持，能有效
目的:结合临床证候资料研究耳鸣证型分布规律;分析痰瘀互结型耳鸣患者人群特征;建立痰瘀互结证耳鸣大鼠模型,并进行模型评估及中枢机制研究。方法:1.第一部分:收集2017年6月21日-2019年8月20日就诊于上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院耳鼻咽喉科耳鸣专科特需门诊的特发性耳鸣患者276例,完成基本资料和证候问诊量表信息采集,进行系统聚类分析。2.第二部分:从上述276例耳鸣患者中选择符合要求的
目的 探析HOPE模式健康管理对中青年急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）经皮冠状动脉介入（percutaneous coronary intervention,PCI）术后依从性、自我管理、生活质量的影响。方法 选取2021年4月—2022年4月海安市人民医院行PCI术治疗的86例中青年AMI患者作为研究对象，依据随机数字表法分为对照组、观察组，每组各4