绿萝组织培养及离体再生体系研究

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为建立高效稳定的绿萝离体再生体系,本试验以绿萝幼嫩叶片为外植体材料,采用间接器官发生途径(愈伤组织途径),较系统地研究了绿萝离体再生的技术体系,初步探讨了植物生长调节剂、基本培养基、C源、外植体、AgNO3以及GA3浓度等对绿萝离体再生的影响。结果表明:(1)在绿萝组织培养中,外植体最佳消毒处理为0.1%HgCl2溶液中处理6min;(2)TDZ浓度和生长素浓度对外植体愈伤组织的诱导具有显著影响,生长素种类对外植体愈伤组织的诱导具有极显著影响,TDZ浓度以0.1-0.5mg·L-1为佳,生长素浓度以0.1 mg·L-1和0.5 mg·L-1为佳,在生长素种类中,NAA对愈伤组织的诱导效果最好,2,4-D次之,再其次为IAA和IBA,外植体愈伤组织最佳诱导培养基为MS+0.2 mg·L-1 TDZ+0.5mg·L-1 NAA,愈伤组织诱导率可达97.62%;(3)基本培养基对外植体愈伤组织的诱导具有显著影响,在1/4MS、1/2MS和MS中,MS为绿萝愈伤组织诱导最佳基本培养基;(4)C源对外植体愈伤组织的诱导具有显著影响,在蔗糖、麦芽糖和葡萄糖三种糖类中,以蔗糖作为C源外植体愈伤组织诱导效果最好;(5)暗培养时间对外植体愈伤组织的诱导无显著影响;(6)外植体类型对愈伤组织的诱导有显著影响,在叶片(带中脉)、叶柄(叶柄基部)和茎段(不带节)中,以叶片(带中脉)和叶柄(叶柄基部)作为外植体愈伤组织诱导效果较佳;(7)生长素浓度对不定芽的诱导无显著影响,细胞分裂素种类和浓度对不定芽的诱导具有显著影响,在TDZ、KT、6-BA中,以1.0-2.0 mg·L-1 6-BA不定芽诱导效果最好,不定芽最佳诱导培养基为:MS+0.1mg·L-1 NAA+1.0mg·L-1 6-BA和MS+0.5mg·L-1 NAA+2.0mg·L-1 6-BA;(8)细胞分裂素种类对不定芽增殖具有极显著影响,细胞分裂素浓度对不定芽增殖具有显著影响,而生长素浓度对不定芽增殖无显著影响,2.0 mg·L-1 6-BA最有利于不定芽增殖,不定芽增殖最适培养基为:MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA;(9)AgNO3对绿萝不定芽增殖具有明显的促进作用,当浓度为3.0 mg·L-1时效果最好,平均增殖倍数为2.05,且无畸形芽的产生;(10)GA3对不定芽增殖具有明显的促进作用,随着CA3浓度的提高,不定芽增殖倍数呈现先升高后降低的趋势,当浓度为3.0 mg·L-1时增殖效果最好,平均增殖倍数为1.71;(11)6-BA浓度对无菌苗壮苗无显著影响,生长素种类及其浓度对无菌小苗壮苗具有显著影响,以MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 IBA最有利于无菌苗的伸长生长,MS+3.0 mg·L-1 6-BA+0.2 mg·L-1 IAA最有利于无菌苗新叶的发生;(12)绿萝无菌小苗较容易生根,但在不同的生根培养基中,根的数量和质量有明显差异,综合考虑生根率和根生长情况,以1/2MS+0.1mg·L-1 NAA+0.2mg·L-1 IBA为宜,平均生根率为100%,平均生根条数为5.74条;
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