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目的:通过检测卵巢储备功能下降（diminished ovarian reserve,DOR）模型大鼠血清激素水平、氧化损伤相关指标、细胞凋亡及卵巢组织肿瘤抑制因子p53（Tumor suppressor p53,p53）、周期蛋白依赖激酶抑制因子p21（Cyclin-dependent kinase inhibitor p21,p21）和核因子相关因子-2（nuclear factor-E2-related factor2,Nrf2）蛋白表达水平,观察资癸益冲方对DOR大鼠卵巢功能的影响并探讨其可能的作用机制。方法:将60只动情周期规律的雌性SD大鼠随机分为正常对照组（n=10）和造模组（n=50）,造模组采用环磷酰胺腹腔注射诱导DOR大鼠模型,取造模成功的30只大鼠随机分为模型组、中药组和辅酶Q10组,每组10只。中药组和辅酶Q10组分别给予资癸益冲方和辅酶Q10灌胃治疗,其余2组给予等容积的生理盐水灌胃。治疗28天结束后,各组大鼠行阴道脱落细胞美兰染色涂片,选取动情前期腹腔麻醉处死大鼠,留取股动脉血,离心后检测血清雌二醇（estradiol,E2）、抗苗勒管激素（anti-Mullerian hormone,AMH）、卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）、黄体生成素（luteinizing hormone,LH）水平和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathioneperoxidase,GSH-Px）、过氧化氨酶（catalase,CAT）活性及丙二醛（malonic dialdehyde,MDA）含量。取卵巢组织,左侧称重后置于4%多聚甲醛溶液中固定,行HE染色观察卵巢组织的病理形态学改变,免疫组织化学检测p53、p21和Nrf2蛋白表达并进行半定量分析,Tunel染色检测细胞凋亡情况并计算凋亡率;右侧卵巢液氮速冻后置于-80℃保存,检测SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA含量,Western blot检测p53、p21和Nrf2蛋白的表达。结果1.大鼠一般情况比较正常对照组大鼠精力旺盛,摄食进水量正常,行为敏捷;模型组大鼠与之相比萎靡迟钝,摄食进水量减少,喜蜷缩;中药组和辅酶Q10组在造模后均表现出与模型组大鼠相似的症状,但经给药治疗后上述反应较模型组减轻,逐渐趋于正常。各组大鼠体质量在实验期间均逐渐增加,差异无统计学意义（P>0.05）。2.大鼠卵巢重量、卵巢系数的比较实验结束后比较各组大鼠左侧卵巢重量并计算卵巢系数,与正常对照组比较,模型组、辅酶Q10组大鼠卵巢重量减轻、卵巢系数变小（P<0.05）。与模型组比较,中药组和辅酶Q10组大鼠卵巢重量增加、卵巢系数变大（P<0.05）。与中药组比较,辅酶Q10组大鼠卵巢重量减轻、卵巢系数变小（P<0.05）。3.大鼠卵巢组织病理形态学改变HE染色结果显示:正常对照组镜下卵巢组织形态结构无异常,可见各级卵泡和黄体发育良好,轮廓清晰,颗粒细胞层数多、排列密集;模型组中各级卵泡数和黄体减少,部分间质区可见炎细胞浸润和病理性纤维化增生,囊性扩张卵泡数增多,颗粒细胞层数减少,排列疏松,闭锁卵泡增多;中药组和辅酶Q10组中各级卵泡数经治疗后有所增加,囊性扩张和闭锁卵泡数减少,颗粒细胞层次增多。4.大鼠血清E2、AMH、FSH和LH水平比较与正常对照组比较,模型组、辅酶Q10组大鼠血清E2、AMH水平降低,FSH、LH水平升高（P<0.05）;中药组大鼠血清E2水平降低,LH水平升高（P<0.05）。与模型组比较,中药组大鼠血清E2、AMH水平上升,FSH、LH水平下降（P<0.05）;辅酶Q10组大鼠血清E2水平上升,FSH水平下降（P<0.05）。与中药组比较,辅酶Q10组大鼠血清E2、AMH水平下降,LH水平升高（P<0.05）。其余指标差异无统计学意义。5.大鼠血清SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA含量比较与正常对照组比较,模型组大鼠血清SOD、GSH-Px、CAT活性下降,MDA含量增多（P<0.05）;中药组大鼠血清GSH-Px、CAT活性下降,MDA含量增多（P<0.05）;辅酶Q10组大鼠血清GSH-Px、CAT活性下降（P<0.05）。与模型组比较,中药组和辅酶Q10组大鼠血清SOD、GSH-Px、CAT活性上升,MDA含量下降（P<0.05）。与中药组比较,辅酶Q10组大鼠血清CAT活性上升（P<0.05）。其余指标差异无统计学意义。6.大鼠卵巢组织SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA含量比较与正常对照组比较,模型组大鼠卵巢组织中SOD、GSH-Px、CAT活性下降,MDA含量增多（P<0.05）;中药组大鼠卵巢组织中GSH-Px、CAT活性下降,MDA含量增多（P<0.05）;辅酶Q10组大鼠卵巢组织中SOD、CAT活性下降（P<0.05）。与模型组比较,中药组大鼠卵巢组织中SOD、GSH-Px、CAT活性上升,MDA含量下降（P<0.05）;辅酶Q10组卵巢组织中SOD、GSH-Px活性上升,MDA含量下降（P<0.05）。与中药组比较,辅酶Q10组大鼠卵巢组织中SOD、CAT活性下降,GSH-Px活性上升（P<0.05）。其余指标差异无统计学意义。7.免疫组化检测卵巢组织p53、p21、Nrf2蛋白表达及半定量分析模型组卵巢组织p53、p21、Nrf2蛋白表达较正常对照组明显增强,主要见于颗粒细胞和黄体细胞;中药组和辅酶Q10组卵巢组织p53、p21、Nrf2蛋白表达范围及强度较模型组均明显减弱。与正常对照组比较,模型组、中药组和辅酶Q10组卵巢组织p53、p21和Nrf2蛋白表达平均光度值升高（P<0.05）。与模型组比较,中药组和辅酶Q10组卵巢组织p53、p21和Nrf2蛋白表达平均光度值降低（P<0.05）。与中药组比较,辅酶Q10组卵巢组织p53、p21蛋白表达平均光度值升高,Nrf2蛋白表达平均光度值降低（P<0.05）。8.Western blot检测卵巢组织p53、p21、Nrf2蛋白表达与正常对照组比较,模型组、中药组和辅酶Q10组卵巢组织p53、p21、Nrf2蛋白表达增强（P<0.05）。与模型组比较,中药组和辅酶Q10组卵巢组织p53、p21、Nrf2蛋白表达减弱（P<0.05）。与中药组比较,辅酶Q10组卵巢组织p53、p21、Nrf2蛋白表达减弱（P<0.05）。9.TUNEL检测卵巢组织细胞凋亡及凋亡率比较正常对照组卵巢组织可见少许颗粒细胞凋亡;模型组可见大量颗粒细胞、黄体细胞凋亡,细胞核呈黄褐色表达;中药组卵巢组织可见部分黄体细胞凋亡;辅酶Q10组可见颗粒细胞、黄体细胞凋亡。与正常对照组比较,模型组、中药组和辅酶Q10组大鼠卵巢组织细胞凋亡率增高（P<0.05）。与模型组比较,中药组和辅酶Q10组卵巢组织细胞凋亡率降低（P<0.05）。与中药组比较,辅酶Q10组卵巢组织细胞凋亡率增高（P<0.05）。结论:1.资癸益冲方可减轻DOR大鼠卵巢的病理损伤,上调血清E2、AMH水平并降低FSH、LH水平,改善卵巢功能。2.资癸益冲方和辅酶Q10可提高DOR大鼠抗氧化物酶活性,降低Nrf2蛋白在卵巢组织中的表达,缓解氧化应激。3.资癸益冲方和辅酶Q10可降低DOR大鼠卵巢组织p53、p21蛋白表达,减少卵巢组织细胞凋亡。